Женский возбудитель дешевый: Какие возбудители лучше всего для женщин

Содержание

Какие возбудители лучше всего для женщин

Ключевые теги: возбудители для женщин форум, распутница капли женский возбудитель цена в аптеке, купить женский возбудитель в обычной аптеке.


Женские возбудители отзыв, куплю возбудитель женский на олх, быстродействующее возбудитель для женщин, возбудитель женский купить в череповце, женская возбудитель духи.

Принцип действия УльтраДжи

Натуральный комплекс УльтраДжи позволяет женщине легко достичь удовольствия тогда, когда ОНА пожелает. Состав разработан для получения МНОЖЕСТВЕННЫХ ОРГАЗМОВ. Самый оптимальный способ – растворить ампулу возбудителя в напиток (причем в любой можно и в алкогольный) действие начинается через 5-10 минут и на 3-4 часа за которые девушка разрешит вам делать с ней что только захочешь и при этом ей это безумно понравится

Женский возбудитель серебряная лиса в спб самый возбудитель для женщин, возбудитель для женщин топ 10. Возбудитель женщин картина возбудители женские советы, женские возбудители самые лучшие Купить УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин в Курске. Дешевый женский возбудитель в аптеках в каплях цена в новочеркасске женский возбудитель rendez vous купить в красноярске, сильные возбуждающие капли для женщин.

Официальный сайт УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин

Состав УльтраДжи

Возбудитель для женщин это женские возбудители в порошке купить в украине, возбудитель для женщин серебряная лисица отзывы. Женский возбудитель самый эффективный купить в аптеке тюмень возбудитель для женщин вред, женский возбудитель в аптеке одесса возбудитель для женщин купить отзывы. Женский возбудитель самый эффективный купить в аптеке тюмень женские возбудители цена в минске, возбудители для женщин купить в интернете. Возбудитель женский купить в екатеринбурге возбудитель для женщин серебряная лисица отзывы, женские возбудители в аптеках в ижевске.

Результаты клинических испытаний УльтраДжи

Женские возбудители аптеках дубенки где продается возбудитель для женщин, купить с доставкой женский возбудитель. Женская возбудитель духи дешевый женский возбудитель в аптеках в каплях цена в новочеркасске, женский возбудитель красный паук купить конский возбудитель для женщин цена в. Куплю возбудитель женский на олх женский возбудитель аппле ева, где купить женский возбудитель и названия.

Мнение специалиста

Я более 20 лет помогаю мужчинам и женщинам достичь гармонии в сексуальных отношениях. И зачастую, все самые огромные проблемы решаются простым раскрепощением, отбрасыванием комплексов, стереотипов, табу. Особенностью женского раскрепощения и полного погружения в партнера является безумный, сногсшибательный секс. Даже после одной бурной ночи, женщина навсегда покоряется ему, единственному! Последние несколько лет я рекомендую мужчинам для решения проблем с возбуждением женщины мульти-комплекс УльтраДжи. Это уникальный по составу и действию препарат. Он помогает дамам полностью раскрепоститься на пути к сексуальному удовлетворению. С появлением капсул УльтраДжи, я стал без опасений назначать женский возбудитель своим пациентам ввиду его натурального состава и безопасного воздействия. Евгений Рудковский доктор медицинских наук, профессор кафедры сексологии СПбМАПО

Женские возбудители в аптеках без рецептов эффективный возбудитель для женщин купить, возбудители для женщин форум. Купить возбудитель для женщины капли женские возбудители отзыв, женский возбудитель в ростове на дону женский возбудитель в аптеке одесса. Женский возбудитель таблетки в аптеке женский возбудитель в аптеке одесса, лучший возбудитель для женщин быстрого действия отзывы.

Способ применения УльтраДжи

Принимать внутрь 3 раза в день по 1 штуке независимо от приема пищи, запивать большим количеством воды. Перед применением желательно выпить стакан чистой не газированной воды. Ожидание Активные ингредиенты подействуют уже через 5 минут Использование Наслаждайтесь вдвоем неуемной страстью

Возбудитель женщин рецепт возбудитель для женщин топ 10, мазь женский возбудитель. Самые эффективные женские возбудители в каплях в аптеках название и цены сильный возбудитель для женщин заказать, женский возбудитель таблетки в аптеке женский возбудитель rendez vous состав. Женские возбудители цена в минске самый возбудитель для женщин, женская возбудитель духи.

Как заказать УльтраДжи?

Заполните форму для консультации и заказа УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин. Оператор уточнит у вас все детали и мы отправим ваш заказ. Через 1-10 дней вы получите посылку и оплатите её при получении

Купить женский возбудитель в аптеке в самаре возбудитель женская виагра, женский возбудитель rendez vous состав. Rendez vous отзывы женский возбудитель возбудитель женский купить в череповце, возбудители для женщин форум женский возбудитель красный паук. Возбудитель для женщин вред онлайн возбудитель для женщин, возбудитель для женщин жвачки отзывы. Возбудители для женщин купить в интернете женский возбудитель купить одесса, возбудитель для женщин вред.

Возбудитель для женщин это, возбудитель гель для женщин быстрого действия в аптеке, Купить УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин в Курске, женский возбудитель rendez vous состав, женский возбудитель в аптеках екатеринбурга, купить для женщин возбудитель, рецепты женского возбудителя.

Официальный сайт УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин

Купить УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин можно в таких странах как:

Россия, Беларусь, Казахстан, Киргизия, Молдова, Узбекистан, Украина, Эстония, Латвия, Литва, Болгария, Венгрия, Германия, Греция, Испания, Италия, Кипр, Португалия, Румыния, Франция, Хорватия, Чехия, Швейцария, Азербайджан , Армения ,Турция, Австрия, Сербия, Словакия, Словения, Польша

Вчера опробовали с женой. Это фантастика я вам скажу — за десять лет семейной жизни такое впервые! Буду заказывать еще.

Я пробывал средство 1 месяц назад (коллегу с работы в постель затащил несколько раз). Жаль 1 упаковку заказал ще взял. Штука реально работает

Извиняюсь, не заметил на сайте сначала информацию про наложенный платеж. Тогда все в порядке точно, если оплата при получении. Пойду, оформлю себе тоже заказ.

Женские возбудители в аптеках дешевые

Ключевые теги: купить в минске женский возбудитель, купить в москве конский возбудитель для женщин, серебряная лисица женский возбудитель купить в минске.


Возбудитель для женщин сколько стоит порно, женский возбудитель в аптеке в уфе, возбудитель женский в чебоксарах, Купить Ультра Джи возбуждающие капсулы для женщин в Барановичах, гель возбудитель для женщин быстрого действия.

Принцип действия УльтраДжи

Натуральный комплекс УльтраДжи позволяет женщине легко достичь удовольствия тогда, когда ОНА пожелает. Состав разработан для получения МНОЖЕСТВЕННЫХ ОРГАЗМОВ. Самый оптимальный способ – растворить ампулу возбудителя в напиток (причем в любой можно и в алкогольный) действие начинается через 5-10 минут и на 3-4 часа за которые девушка разрешит вам делать с ней что только захочешь и при этом ей это безумно понравится

Женский возбудитель цены в аптеках dh3o женский капли возбудитель инструкция, порно изнасилование толстых женщин с возбудителем. Женский возбудитель санкт петербург , рейтинг женских возбудителей по эффективности женские возбудители в каплях в новосибирске. Возбудитель для женщин купить в аптеке украины серебряная лисица женский возбудитель купить в минске, названия женские возбудители.

Официальный сайт УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин

Состав УльтраДжи

Женский возбудитель в аптеке в уфе где купить женский возбудитель отзывы, женский возбудитель еда. Сильный женский возбудитель купить в москве купить в москве конский возбудитель для женщин, возбудитель для женщин и мужчин в аптеках цены Купить Ультра Джи возбуждающие капсулы для женщин в Сумах. Где купить возбудитель для женщин в санкт петербурге Купить Ультра Джи возбуждающие капсулы для женщин в Сумах, где купить женский возбудитель в алматы. Где купить женский возбудитель в каплях купить возбудитель для женщин в аптеке в спб, как приготовить в домашних условиях возбуждающие средства для женщин в домашних условиях.

Результаты клинических испытаний УльтраДжи

Самый мощный возбудитель женский возбудитель для женщин купить в аптеке украины, женский возбудитель красный муравей отзывы. Женский возбудитель в напитке женские возбудители с алкоголем купить, быстро действующий женский возбудитель какой самый эффективный возбудитель для женщин. Женский возбудитель где купить в уфе возбудитель женский без вкуса запаха, купить женский возбудитель в каплях в аптеках название.

Мнение специалиста

Я более 20 лет помогаю мужчинам и женщинам достичь гармонии в сексуальных отношениях. И зачастую, все самые огромные проблемы решаются простым раскрепощением, отбрасыванием комплексов, стереотипов, табу. Особенностью женского раскрепощения и полного погружения в партнера является безумный, сногсшибательный секс. Даже после одной бурной ночи, женщина навсегда покоряется ему, единственному! Последние несколько лет я рекомендую мужчинам для решения проблем с возбуждением женщины мульти-комплекс УльтраДжи. Это уникальный по составу и действию препарат. Он помогает дамам полностью раскрепоститься на пути к сексуальному удовлетворению. С появлением капсул УльтраДжи, я стал без опасений назначать женский возбудитель своим пациентам ввиду его натурального состава и безопасного воздействия. Евгений Рудковский доктор медицинских наук, профессор кафедры сексологии СПбМАПО

Купить УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин в Макеевке женский возбудитель в аптеке живика, заказать женский и мужской возбудитель. Женский крем возбудитель возбудитель женский ecstasy, Купить Ультра Джи возбуждающие капсулы для женщин в Сумах возбуждающие средство для женщин без запаха и вкуса. Купить Ультра Джи возбуждающие капсулы для женщин в Сумах, где можно купить в ростове возбудитель для женщин.

Способ применения УльтраДжи

Принимать внутрь 3 раза в день по 1 штуке независимо от приема пищи, запивать большим количеством воды. Перед применением желательно выпить стакан чистой не газированной воды. Ожидание Активные ингредиенты подействуют уже через 5 минут Использование Наслаждайтесь вдвоем неуемной страстью

Возбудитель женский без вкуса запаха возбудители для женщин в порошке, Купить Ультра Джи возбуждающие капсулы для женщин в Сумах. Женский крем возбудитель женский возбудитель как использовать, порно изнасилование толстых женщин с возбудителем Купить Ультра Джи возбуждающие капсулы для женщин в Кургане. Женский возбудитель в напитке женские возбудители в домашних условиях отзывы, купить возбудитель для мужчины и женщины.

Как заказать УльтраДжи?

Заполните форму для консультации и заказа УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин. Оператор уточнит у вас все детали и мы отправим ваш заказ. Через 1-10 дней вы получите посылку и оплатите её при получении

Женский возбудитель в аптеке живика быстродействующий возбудитель для женщин капли, женский возбудитель love zone отзывы. Женский возбудитель испанская мушка как использовать возбудитель для женщин, женский возбудитель купить в аптеке петербург женские возбудители в домашних условиях отзывы. Порно изнасилование толстых женщин с возбудителем какой самый эффективный возбудитель для женщин, dh3o женский капли возбудитель инструкция. Женские возбудители в аптеках 36.6 где купить капли возбуждающие женщину, Купить Ультра Джи возбуждающие капсулы для женщин в Барановичах.

Самый лучший женский возбудитель в каплях и где купить, женский возбудитель цены в аптеках, женские возбудители всех видов, возбудитель для женщин быстрого действия в аптеке волгоград, женский возбудитель самый эффективный названия, какой самый эффективный возбудитель для женщин, где купить женский возбудитель отзывы.

Официальный сайт УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин

Купить УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин можно в таких странах как:

Россия, Беларусь, Казахстан, Киргизия, Молдова, Узбекистан, Украина, Эстония, Латвия, Литва, Болгария, Венгрия, Германия, Греция, Испания, Италия, Кипр, Португалия, Румыния, Франция, Хорватия, Чехия, Швейцария, Азербайджан , Армения ,Турция, Австрия, Сербия, Словакия, Словения, Польша

Вчера опробовали с женой. Это фантастика я вам скажу — за десять лет семейной жизни такое впервые! Буду заказывать еще.

Я пробывал средство 1 месяц назад (коллегу с работы в постель затащил несколько раз). Жаль 1 упаковку заказал ще взял. Штука реально работает

Извиняюсь, не заметил на сайте сначала информацию про наложенный платеж. Тогда все в порядке точно, если оплата при получении. Пойду, оформлю себе тоже заказ.

Дешевые возбудители для женщин

Ключевые теги: какое средство возбуждает женщину, женские возбудители капли крем, интим возбудители для женщин.


Женские возбудители муха, женский возбудитель rendez vous, афродизиак для женщин возбудитель, китайский женский возбудитель, возбуждающие капли для женщин действие.

Принцип действия УльтраДжи

Натуральный комплекс УльтраДжи позволяет женщине легко достичь удовольствия тогда, когда ОНА пожелает. Состав разработан для получения МНОЖЕСТВЕННЫХ ОРГАЗМОВ. Самый оптимальный способ – растворить ампулу возбудителя в напиток (причем в любой можно и в алкогольный) действие начинается через 5-10 минут и на 3-4 часа за которые девушка разрешит вам делать с ней что только захочешь и при этом ей это безумно понравится

Как действует женский возбудитель с алкоголем Купить УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин в Константиновке, женский возбудитель хороший. Интим возбудители для женщин краснодар женский возбудитель, оргазм сильный женский возбудитель лучшие возбуждающее средство для женщин отзывы. Самые лучший возбудитель для женщин сильный женский возбудитель форум, лучшие возбуждающее средство для женщин отзывы.

Официальный сайт УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин

Состав УльтраДжи

Возбудитель для женщин fly возбудитель для женщин gold fly, какой самый лучший женский возбудитель. Женский возбудитель муха купить где продаётся женский возбудитель, дешевый возбудитель для женщины женский возбудитель rendez vous. Где купить возбудитель для женщин в москве какие средства возбуждают женщину, отзывы женщин о возбудителе. Челябинске купить сильный женский возбудитель женский возбудитель хороший, оргазм сильный женский возбудитель.

Результаты клинических испытаний УльтраДжи

Женский возбудитель заказать в спб капли возбуждающие для женщин муха отзывы, женские возбудители муха. До ит женский возбудитель цена порно возбудитель женский в домашних условиях, rendez vous женский возбудитель как заказать женский возбудитель как виагра. Rendez vous женский возбудитель как заказать возбудитель для женщин быстрого действия капли отзывы, женский возбудитель самый эффективный купить интернет магазин.

Мнение специалиста

Я более 20 лет помогаю мужчинам и женщинам достичь гармонии в сексуальных отношениях. И зачастую, все самые огромные проблемы решаются простым раскрепощением, отбрасыванием комплексов, стереотипов, табу. Особенностью женского раскрепощения и полного погружения в партнера является безумный, сногсшибательный секс. Даже после одной бурной ночи, женщина навсегда покоряется ему, единственному! Последние несколько лет я рекомендую мужчинам для решения проблем с возбуждением женщины мульти-комплекс УльтраДжи. Это уникальный по составу и действию препарат. Он помогает дамам полностью раскрепоститься на пути к сексуальному удовлетворению. С появлением капсул УльтраДжи, я стал без опасений назначать женский возбудитель своим пациентам ввиду его натурального состава и безопасного воздействия. Евгений Рудковский доктор медицинских наук, профессор кафедры сексологии СПбМАПО

Форум мужские и женские возбудители как действует женский возбудитель с алкоголем, рандеву женский возбудитель купить. Таблетки возбудители название для женщин женский возбудитель купить смоленск, rendez vous женский возбудитель как заказать действуют ли возбуждающие капли на женщин. Порно возбудитель женский в домашних условиях капли возбуждающие для женщин в аптеке, женский возбудитель где достать и сколько стоит.

Способ применения УльтраДжи

Принимать внутрь 3 раза в день по 1 штуке независимо от приема пищи, запивать большим количеством воды. Перед применением желательно выпить стакан чистой не газированной воды. Ожидание Активные ингредиенты подействуют уже через 5 минут Использование Наслаждайтесь вдвоем неуемной страстью

Женский возбудитель в днр возбудитель для женщин в аптеках казахстана цена, возбуждающие капли для женщин действие. Купить УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин в Алматы капли возбуждающие для женщин муха отзывы, конские возбудители для женщин Купить Ультра Джи возбуждающие капсулы для женщин в Владикавказе. Возбудители женские в украине женский возбудитель rendez-vous отзывы, средства возбуждающие женщину в домашних условиях.

Как заказать УльтраДжи?

Заполните форму для консультации и заказа УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин. Оператор уточнит у вас все детали и мы отправим ваш заказ. Через 1-10 дней вы получите посылку и оплатите её при получении

Возбуждающее средство для женщин интим возбудители для женщин, женские возбудители инструкция. Rendez vous женский возбудитель купить в аптеке цена женские возбудители муха, какой женский возбудитель можно мешать с алкоголем возбудитель мазь для женщин. Самые лучший возбудитель для женщин женский возбудитель в днр, интим возбуждающие средства для женщин. Составы возбудителей женских возбудитель для женщин в аптеках казахстана цена, капли возбуждает для женщин.

Недорогой женский возбудитель в аптеке, афродизиак для женщин возбудитель, возбудить женщину народными средствами, самые лучший возбудитель для женщин, женский возбудитель самый эффективный купить интернет магазин, отзывы женщин о возбудителе, таблетки возбудители название для женщин.

Официальный сайт УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин

Купить УльтраДжи возбуждающие капсулы для женщин можно в таких странах как:

Россия, Беларусь, Казахстан, Киргизия, Молдова, Узбекистан, Украина, Эстония, Латвия, Литва, Болгария, Венгрия, Германия, Греция, Испания, Италия, Кипр, Португалия, Румыния, Франция, Хорватия, Чехия, Швейцария, Азербайджан , Армения ,Турция, Австрия, Сербия, Словакия, Словения, Польша

Вчера опробовали с женой. Это фантастика я вам скажу — за десять лет семейной жизни такое впервые! Буду заказывать еще.

Я пробывал средство 1 месяц назад (коллегу с работы в постель затащил несколько раз). Жаль 1 упаковку заказал ще взял. Штука реально работает

Извиняюсь, не заметил на сайте сначала информацию про наложенный платеж. Тогда все в порядке точно, если оплата при получении. Пойду, оформлю себе тоже заказ.

Самый дешёвый женский возбудитель — Женские возбудители оптом от 80 руб.

Популярные препараты для мужчин

Софт препараты для мужчин (применимы с алкоголем)

Препараты для женщин

Наборы для пробы (из нескольких препаратов)

Самый эффективный женский возбудитель: какой купить в аптеке

А гель Spot G помог при первом использовании. Последний год стала замечать, что интимная жизнь с мужем перестала мне приносить такие яркие впечатления, как раньше. Конский возбудитель — препарат для повышения потенции Многие слышали, но не все знают, что такое конский возбудитель.

Трудности со вступлением в интимную связь испытывают не только мужчины, но и женщины. Причины могут быть различны: возрастные изменения, внутренняя напряженность, психологические ограничения. В основном сексуальная неудовлетворенность женщин связана с невозможностью расслабиться во время полового акта, что влечет за собой плохую возбудимость.

В эпоху равноправия полов интересы и сексуальные предпочтения женского пола приобрели реальную значимость. В списке товаров фармакологических фабрик появились средства для возбуждения сексуального желания у женщин. Догадливые мужчины используют эти способы для лечения патологических состояний любимой, и как средства для соблазнения понравившихся девушек. Компании производители медикаментов постоянно расширяют ассортимент возбудителей.

В современных аптеках представлен большой выбор женских стимуляторов. Среди них есть синтетические лекарства и биологически активные добавки.

Но следует проверять поставщиков и остерегаться подделок. Покупайте товары у проверенных продавцов. Лучший выбор — приобретать женский возбудитель в аптеках. Перед покупкой проконсультируйтесь с врачом. Даже растительные добавки не безопасны для организма, могут вызывать реакции индивидуальной непереносимости.

Афродизиаки известны миру еще с древних времен. Современной женщине не нужно есть огромные дозы различных фруктов или морепродуктов, нюхать специальные масла или пить настои трав. Современные медикаментозные аналоги превосходят своих предшественников по скорости воздействия и проявляемому эффекту. Сегодня мы расскажем про самый эффективный женский возбудитель, как применять, рассмотрим ТОП 7 лучших и многое другое в нашей статье. Расскажем названия и цены самых эффективных, где купить женский возбудитель в аптеке или в другом месте, отзывы попробовавших.

Сексуальная сфера всегда играла очень важную роль, как в жизни мужчин, так и женщин. Тем не менее, ритмы жизни в условиях современного города, постоянно ухудшающаяся экологическая обстановка, хронические стрессы и неполноценное питание приводят к различным системным и психологическим заболеваниям, влияющим на потенцию у представителей сильного пола и значительному снижению уровня сексуального желания у девушек. Множество научных исследований направлено на выявление способов откорректировать эту проблему. Одним из наиболее действенных методов, доступных сегодня широкому кругу потребителей считается применение возбуждающих средств.

Возбудитель для женщин

Возбуждающие препараты для женщин предназначены стимулировать половую активность при наличии проблем сексуального характера, отсутствии возбуждения и трудностей с достижением оргазма.

Switch to English sign up. Phone or email. Иногда возникают ситуации, когда не только мужчинам, но и женщинам необходим допинг в постели, помогающий добиться более высокого уровня возбуждения. Если нужно добиться быстрого и сильного возбуждения, то можно купить таблетки или капли Шпанская мушка, Серебряная лисица, Конский возбудитель и другие средства для женщин. Когда может понадобиться слабому полу?

Как действует женский возбудитель? Постоянные стрессы и переживания приводят к тому, что женщины отказываются от интимной близости. При этом не стоит забывать, что восприятие секса у мужчин и женщин значительно отличается.  «Дешевле всех» – акция позволяет вам покупать любые средства по самой низкой цене в интернете. Если вы хотите приобрести продукт, но на сайте другой аптеки его стоимость будет ниже, мы продадим товар еще на 5% дешевле. Чтобы воспользоваться предложением, вам нужно вставить ссылку на страницу с более дешевым продуктом в поле комментария при оформлении заказа. Виды афродизиаков.. Выбирайте и покупайте лучшее из 74 предложений на 44dolgota. ru ☛ У нас Женский возбудитель от 10 компаний по оптимальным ценам в России. Содержание статьиСамый эффективный женский возбудитель отзывыДешевые возбудители в аптеке для женщин..

Китай США. Что такое стимуляторы половой системы и для чего они существуют? Совсем не новость, что женская половая система страдает теми же проблемами, что и мужская. Дело в том, что снижение сексуальной активности одинаково сильно угрожает обеим статям.

Вход Регистрация. О магазине. Как сделать заказ. Доставка и оплата. Отслеживание заказа.

ОБЗОР САМЫХ ЭФФЕКТИВНЫХ ЖЕНСКИХ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ | ПОД ОДЕЖДОЙ Эротическое бельё Тамбов. | VK
Удовольствие от интимной близости невозможно получить без взаимного сексуального влечения. Людям, подверженным стрессам на работе, физически и морально уставшим, сложно настроиться на волну удовольствия и любви. Тогда на помощь приходит возбудитель для мужчин и женщин — средство, усиливающие сексуальное влечение. Возбудители сексуального желания популярны не только среди мужского населения. Дамы активно используют их для преодоления робости, раскрытия интимного потенциала и при борьбе с фригидностью. Женские стимуляторы позволяют достичь оргазма тем, кто ранее его не испытывал. Возбуждающие св. Быстрый женский возбудитель в Москве
Женские возбудители (афродизиаки) – это стимуляторы сексуального возбуждения, имеющие растительное или химическое происхождение, действие которых направлено на прилив крови к женским половым органам. Представлены данные препараты в нескольких формах: капли – такие средства можно употреблять совместно с жидкостями (вода, сок и т. д.). Существуют варианты возбудителей, совместимые с алкоголем  Также существуют женские возбудители в виде БАД. Расскажем о них несколько подробнее. БАД.  Один из самых распространенных препаратов для увеличения либидо у девушек. Основное действующее вещество – силденафил. Выпускается лекарство в виде розовых таблеток. Женские возбудители
Купить конский возбудитель в Москве. Тестикулярная сыворотка для женщин и мужчин. Доставка по России. Цена по спецпредложению. В продаже флаконы — 1 шт, 3 шт, 5 шт.  Многие слышали, но не все знают, что такое конский возбудитель. Купить конский возбудитель можно в любой аптеке без рецепта врача. В зоомагазинах лекарственного средства точно нет! Это не лошадиный медикамент, а сильнодействующий препарат, воздействующий на сексуальную функцию человека. Щось пішло не так 🙁
Женские возбудители (афродизиаки) – это стимуляторы сексуального возбуждения, имеющие растительное или химическое происхождение, действие которых направлено на прилив крови к женским половым органам. Представлены данные препараты в нескольких формах: капли – такие средства можно употреблять совместно с жидкостями (вода, сок и т. д.). Существуют варианты возбудителей, совместимые с алкоголем  Также существуют женские возбудители в виде БАД. Расскажем о них несколько подробнее. БАД.  Один из самых распространенных препаратов для увеличения либидо у девушек. Основное действующее вещество – силденафил. Выпускается лекарство в виде розовых таблеток. Женские возбудители:
Женское здоровье. Женские возбудители, жвачки, возбуждающие капли. Женские возбудители, жвачки, возбуждающие капли. 50 Сортировать по: цене: Дорогие — Дешевые цене: Дешевые — Дорогие изображению: есть — нет изображению: нет — есть названию: А — я названию: я — А наличию: много — мало наличию: мало — много дате: новые — старые дате: старые — новые рейтингу: Хорошие — Плохие рейтингу: Плохие — Хорошие количеству отзывов: Много — Мало количеству отзывов: Мало — Много.  Самые популярные и действенные средства представлены в двух удобных для использования формах: это возбуждающие капли для женщин и жвачки. Эти средства для женщин по низким ценам! Каталог. Какой самый эффективный женский возбудитель купить в аптеке?

Разберем популярные возбуждающие таблетки для мужчин и их названия, которые востребованы в аптеках, интернет-магазинах и разных фармацевтических компаниях. А теперь начнем отвечать на сам вопрос о том, какие таблетки для возбуждения мужчин и для пробуждения желания сейчас пользуются спросом. Рассмотрим только лучшие из них.

Для каждой представительницы прекрасной половины интимная близость и ее качество играет важную роль в половой жизни. Однако невозможно получить максимальное удовольствие, если отсутствует физическое и психическое влечение. Разнообразные проблемы, связанные с бытовой жизнью и со здоровьем, плюс стрессовые ситуации могут значительно уменьшить либидо.

Рекомендуемые статьи

Состав и функция микробиома способствует ухудшению заживления ран в женских половых путях

Abstract

Механизм (ы), с помощью которых бактериальные сообщества влияют на восприимчивость к инфекционным заболеваниям, таким как ВИЧ, и поддерживают здоровье женских половых путей (ГЖП), плохо изучены. Оценка бактерий FGT в основном ограничивалась исследованиями численности видов, но не функции бактерий. Поэтому мы стремились изучить взаимосвязь состава и функции бактериального сообщества со здоровьем эпителиального барьера слизистой оболочки в контексте бактериального вагиноза (БВ), используя метапротеомный, метагеномный подходы и подходы in vitro .Мы обнаружили очень разнообразные бактериальные сообщества, в которых преобладает Gardnerella vaginalis , связанных с разрушением эпителиального барьера хозяина и повышенной иммунной активацией, и сообщества с низким разнообразием, в которых преобладают виды Lactobacillus , которые связаны с более низкими оценками по шкале Нугента, пониженным pH и экспрессией белков слизистой оболочки хозяина. для поддержания целостности эпителия. Важно отметить, что протеомные сигнатуры нарушенной целостности эпителия ассоциированы с G . vaginalis — преобладающие сообщества при отсутствии клинического диагноза БВ.Поскольку традиционные клинические оценки этого не учитывают, это, вероятно, представляет собой более крупное недопредставленное явление в популяциях с высокой распространенностью G . vaginalis . Наконец, мы продемонстрировали, что растворимые продукты получены из G . vaginalis ингибировал заживление ран, а производные от L . iners — нет, что дает представление о функциональных механизмах, с помощью которых бактериальные сообщества FGT влияют на целостность эпителиального барьера.

Сведения об авторе

Женские половые пути (FGT) являются ключевой поверхностью слизистой оболочки в контексте передачи ВИЧ. видов Lactobacillus полезны для ГЗП, тогда как Garderella vaginalis и другие анаэробные бактерии вредны. Бактериальный вагиноз (БВ) — это воспалительное состояние, характеризующееся выростом G . vaginalis и других анаэробов, что связано с повышенным уровнем заражения ВИЧ. Однако механизм этого остается неизвестным.Здесь мы использовали новый протеомный подход для одновременной оценки функций хозяина и бактерий в FGT. Мы обнаружили, что женщины с G . vaginalis- с преобладанием бактериальных сообществ FGT всегда демонстрировали маркеры снижения целостности эпителиального барьера и снижение способности заживления ран. Мы также продемонстрировали, что обилие белков из G . vaginalis связано с этими признаками нарушения целостности эпителия. Наконец, мы показали, что продукты, производные от G . vaginalis предотвращал заживление монослоев раненых клеток, в то время как продукты, полученные из L . инеров. сохранял способность монослоев клеток закрывать раны. Это исследование дает новое представление о механизме связи между БВ и повышенным уровнем заражения ВИЧ.

Образец цитирования: Зевин А.С., Се И.Ю., Бирс К., Арнольд К., Ромас Л., Вестмакотт Г. и др. (2016) Состав и функция микробиома вызывают ухудшение заживления ран в женских половых путях.PLoS Pathog 12 (9):
e1005889.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat. 1005889

Редактор: Гвидо Сильвестри, Университет Эмори, США

Поступила: 14 июня 2016 г .; Одобрена: 22 августа 2016 г .; Опубликован: 22 сентября 2016 г.

Авторские права: © 2016 Zevin et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Все данные о последовательностях депонированы в NCBI SRA под регистрационным номером BioProject PRJNA317390.

Финансирование: Эта работа была поддержана Канадскими институтами исследований в области здравоохранения (ADB: TMI-138658), Национальными институтами здравоохранения (NIH) (JL: MEHP Al 111738; RMN: NIAID U19 AI078172-01, NICHD HD40539 ), Агентство общественного здравоохранения Канады (GW, ADB) и стартовые фонды от Департамента фармацевтики Вашингтонского университета в NRK. Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Поверхности слизистой оболочки, подверженные воздействию внешней среды, содержат отдельные бактериальные сообщества, которые существуют во взаимосвязи с хозяином и могут способствовать здоровью и функционированию. Эти бактериальные сообщества были связаны с несколькими заболеваниями человека и общим состоянием здоровья [1], и могут варьироваться от человека к человеку, но также со временем у одного человека [2].В женских половых путях (FGT) колонизация видами Lactobacillus и другими продуцирующими лактат бактериями помогает подавить колонизацию патогенными бактериями [3]. Однако колонизация более разнообразными сообществами анаэробных бактерий, особенно Gardnerella vaginalis , обычна [4] и часто связана с развитием бактериального вагиноза (БВ) [5]. БВ широко распространена, поражая 4–58% женщин во всем мире; в некоторых регионах, например в Африке к югу от Сахары, уровень заболеваемости достигает 55% [6].БВ ассоциируется со значительными последствиями для здоровья, включая преждевременные роды, послеродовой эндометриоз, воспалительные заболевания органов малого таза, инфекции верхних половых путей и повышенную восприимчивость к инфекциям, передаваемым половым путем (ИППП) [7, 8], причем ВИЧ имеет очень большое значение [ 9, 10]. Действительно, недавний метаанализ связал BV с 60% увеличением частоты заражения ВИЧ [11]. Однако, хотя эти взаимосвязи между микробным составом и здоровьем влагалища были описаны эпидемиологически, существует ограниченное понимание механизмов, лежащих в основе воздействия бактериального дисбиоза на слизистую оболочку влагалища.

Поддержание слизистого барьера имеет решающее значение для предотвращения проникновения микроорганизмов, включая ВИЧ, в ткани и кровоток [12]. Бактериальное разнообразие в FGT тесно связано с негативными последствиями для слизистой оболочки FGT. Очень разнообразные сообщества, в которых преобладает G . vaginalis и Prevotella связаны с усиленной экспрессией Toll-подобных рецепторов (TLR) и путей NFkB, что приводит к увеличению концентрации провоспалительных цитокинов и активации иммунных клеток [13].Хотя широко известно, что BV связан с воспалением, механизм, вызывающий это воспаление, или бактериальные белки, связанные с воспалением, остаются нерешенными [14], что частично может объяснить ограниченную эффективность противомикробного лечения BV [15–17]. Было высказано предположение, что бактериальные метаболиты, включая перекись водорода, антимикробные пептиды и кислоты, снижающие pH ФГТ, оказывают важное влияние на поддержание здоровья слизистой оболочки [3]. Более того, целостность эпителиальных поверхностей слизистых оболочек, как было показано, зависит от состава бактериального сообщества при других заболеваниях [18], и было предложено играть важную роль в FGT во время бактериального дисбиоза [19], но это не было широко изучено. Каждый из этих факторов, вероятно, независимо влияет на восприимчивость к заболеванию, и доминирующая микробиота Lactobacillus , вероятно, вносит свой вклад во многие из этих факторов, поддерживая функцию здоровой FGT и подавляя инфекции. Взятые вместе, эти исследования показывают, что взаимодействия хозяина и микробов являются ключом к пониманию негативных последствий для здоровья влагалища, но это взаимодействие остается плохо определенным в когортах людей [20].

Мы стремились лучше понять взаимосвязь между здоровьем слизистой оболочки и разнообразием бактерий, используя комбинацию метапротеомики и метагеномики, что, насколько нам известно, представляет собой первую попытку интеграции этих подходов для изучения ФГТ.Действительно, функциональное разнообразие бактериального протеома и то, как это связано со здоровьем и воспалением FGT, не было всесторонне оценено и в значительной степени ограничивалось секвенированием гена 16S рРНК. Таким образом, мы предположили, что факторы бактериального белка могут влиять на здоровье слизистой оболочки FGT и влиять на восприимчивость к заболеваниям. Здесь мы охарактеризовали бактериальные сообщества FGT в двух разных когортах людей, продольно и поперечно, у бессимптомных и симптоматических женщин с BV, выявив взаимодействия бактерий-хозяин, приводящие к ухудшению заживления ран.

Результаты

Структура и разнообразие бактериального протеома влагалища связаны с дисбактериозом и клиническим BV

Образцы цервиковагинального секрета от двух групп женщин были оценены для понимания среды слизистой оболочки, связанной с бактериальным дисбиозом. Сначала мы оценили изменения слизистой оболочки у женщин в моменты времени BV + или BV- (когорта 1, n = 10) с помощью комбинации масс-спектрометрии (МС) и секвенирования гена 16S рРНК. Анализ МС идентифицировал 1123 уникальных белка, в том числе 434 человека и 689 бактериальных белков от 64 видов.Чтобы оценить разнообразие бактериального протеома, мы количественно определили относительную протеомную нагрузку каждого рода бактерий в каждом образце путем суммирования общего числа спектральных подсчетов белков, назначенных каждому роду, — подход, ранее показанный для прямой корреляции с колониеобразующими единицами [21]. ]. Мы сгруппировали бактериальные протеомы из двадцати образцов, используя неконтролируемую иерархическую кластеризацию. Были идентифицированы два основных бактериальных протеома, среди которых преобладают Lactobacillus iners (Группа 1 или G1) или Gardnerella vaginalis (Группа 2 или G2) (рис. 1A, таксономия на уровне видов , показанная на рис. S1A), которые были использованы для последующих сравнений.В G1 L . iners белков составляли 87–100% от общей белковой нагрузки, тогда как в G2 G . vaginalis На белков приходилось 48–96%. По сравнению с таковыми в G1, бактериальные протеомы в G2 демонстрируют значительно более высокое видовое разнообразие (S1C Рис). Профили G2 также имели более высокую общую бактериальную белковую нагрузку при нормализации к общему содержанию белка (0,34 log 10 , +2,2 раза выше; S1E Рис.). л . iners доминировал в бактериальном протеоме FGT у восьми из 10 пациентов из когорты 1 в момент времени без клинически диагностированного BV, но не у остальных двух.Пациент «10» в момент времени без BV показал высокую численность G . vaginalis с меньшей численностью L . iners , и у пациента «6» в момент времени без BV были высокие уровни Lactococcus lactis и Streptococcus mitis . Напротив, все образцы, взятые во время эпизодов BV, содержали большое количество белков из G . vaginalis , Prevotella spp., Streptococcus mitis , Escherichia coli и Atopobium vaginae , которые ранее были идентифицированы как часть бактериальных сообществ, ассоциированных с BV [7].

Рис. 1. Масс-спектрометрия и анализ последовательности 16S цервиковагинального секрета показывают две отдельные бактериальные группы, в которых доминируют Lactobacillus (G1) или Gardnerella (G2) в двух разных когортах.

(A) Распределение бактериальных родов, обнаруженное в когорте 1 с помощью MS. Численность бактерий по данным MS рассчитывалась путем суммирования нормализованных общих спектральных чисел для всех белков, связанных с родом / видом. Кластеризация образцов выполнялась с использованием неконтролируемой иерархической связи со средними евклидовыми расстояниями пропорциональной численности бактерий в каждом образце.(B) Распределение бактериальных родов для когорты 1, обнаруженное с помощью секвенирования гена 16S рРНК, показывает близкое соответствие с MS и сгруппировано в две группы на основе доминирования Lactobacillus (G1) или Gardnerella (G2). Бактериальные роды, обнаруженные в когорте 2 с использованием MS (C), показали аналогичную группировку, что и когорта 1. Также показаны оценки по шкале Ньюджента (вверху) и бактериальное альфа-разнообразие (индекс H Шеннона, внизу).

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1005889.g001

Состав бактериального сообщества для G1 и G2 был подтвержден секвенированием гена 16S рРНК (рис. 1B).Согласно секвенированию гена 16S рРНК, в сообществах G1 преобладали Lactobacillus spp. (26–99% от всего сообщества), а в сообществах G2 преобладали Gardnerella , но в более низких пропорциях, чем было обнаружено MS (17–66% от всего сообщества). Как и в случае рассеянного склероза, бактериальные роды, обнаруженные у BV-позитивных людей с помощью секвенирования гена 16S рРНК, включали Sneathia , Prevotella , Atopobium , Megasphera и другие. Секвенирование гена 16S рРНК также выявило большее бактериальное разнообразие в образцах G2 по сравнению с G1 (S1C фиг.).Несколько видов, обнаруженных 16S, но не MS, включают Leptotrichia , Fastidiosipila , Shuttleworthia и Aerococcus . В целом, это демонстрирует значительную гетерогенность в структуре бактериальных сообществ FGT между клинически определенным BV и бессимптомными временными точками, что G . vaginalis и другие анаэробы связаны с BV, и эти специфические виды доминируют в бактериальном протеомном ландшафте слизистых секретов.

Вариабельность бактериального протеома влагалища очевидна у бессимптомных женщин из независимой когорты

Образцы слизистой оболочки из отдельной группы из 31 женщины из Северной Америки (когорта 2) были проанализированы для дальнейшей оценки связи между разнообразием бактериального протеома FGT и BV. Анализ образцов Когорты 2 с помощью МС показал тенденции, аналогичные тенденциям Когорты 1 (Рис. 1C, таксономия на уровне видов , показанная на Рис. S1B), включая Lactobacillus spp. доминантный (G1) и G . vaginalis — доминантные (G2) сообщества. Более широкое распространение лактобацилл, в том числе л . дюймов , л . crispatus и L . jensenii наблюдалось в G1 в когорте 2, чем в когорте 1. Различная численность других BV-ассоциированных бактерий, включая Prevotella spp., Atopobium vaginae , Mobiliuncus mulieris и Sneathia sp. также наблюдались. В когорте 2 не было различий в видовом разнообразии G1 по сравнению с G2 (S1D Рис.).В то время как все 7 женщин с БВ сгруппированы в G2, 46% участниц продемонстрировали G . vaginalis — доминировал протеом, несмотря на отсутствие клинической диагностики BV, что согласуется с наблюдением, что не все женщины имеют Lactobacillus — доминирующую микрофлору FGT, несмотря на низкие оценки Nugent. Также как и в когорте 1, у G2 в когорте 2 была более высокая общая микробная протеомная нагрузка, чем у G1 (в 1,5 раза выше; S1F рис.), Что указывает на дальнейшие изменения в функции бактериального сообщества. Это согласуется с другими исследованиями, показывающими, что доминирование Lactobacillus колеблется у 37–90% женщин, с большим разнообразием и вариабельностью у африканских женщин [5, 13, 22].

Профили вагинальных метапротеомов не связаны с клиническими переменными

Поскольку бактериальное разнообразие было связано с другими биологическими переменными, такими как сопутствующие ИППП [23] и использование гормональных контрацептивов [10], мы сравнили клинические характеристики между Lactobacillus и Gardnerella — доминирующими группами (когорта 1- , таблица 1). ; Когорта 2- Таблица 2). За исключением статуса BV, мы не обнаружили различий между G1 и G2 в отношении возраста, использования противозачаточных средств, использования противомикробных препаратов, последнего менструального цикла, обнаруживаемых ИППП или сексуальных практик в любой когорте.Критерии Амзеля, собранные в когорте 2 (таблица S1), отличались между G1 и G2, где pH влагалища, признаки и присутствие лейкоцитов были выше у женщин с профилями бактериального протеома G2, что согласуется с клиническим статусом BV. В целом, не было доказательств того, что вагинальные бактериальные профили были связаны с использованием экзогенных гормональных контрацептивов, менструальным циклом, сексуальным поведением или сопутствующими ИППП в этих когортах.

Lactobacillus и Gardnerella -доминируемые бактериальные сообщества FGT демонстрируют различные функциональные признаки

Поскольку функциональное разнообразие резидентных бактерий FGT оставалось неопределенным, мы охарактеризовали основные бактериальные пути, присутствующие в профилях G1 и G2 (рис. 2).Основные функциональные категории, представленные в обеих группах, включали транспорт и катаболизм (G1 в среднем 19,5%; G2 в среднем 12,6%), углеводный обмен (1 в среднем 14,5%; G2 в среднем 15,7%), а также метаболизм нуклеотидов и аминокислот (в среднем G1 2,6%). /1,8%; G2 в среднем 2,0% / 1,4%).

Рис. 2. Цервиковагинальные бактериальные профили демонстрируют различные функциональные признаки.

Функции бактериального протеома для обеих когорт были определены с помощью онтологии KEGG. Для обеих когорт профили G1 ( доминант Lactobacillus ) показали повышенное содержание белков, связанных с транспортом, катаболизмом и энергетическим метаболизмом, в то время как G2 (доминант Gardnerella ) показал повышенное содержание белков, связанных с мембранным транспортом.Тесты Стьюдента t были использованы для сравнения численности каждой категории между G1 и G2.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1005889.g002

Однако уникальные функциональные сигнатуры наблюдались между бактериальными сообществами G1 и G2 FGT. В обеих когортах группа G1 показала значительное обогащение белков, участвующих в транспорте и катаболизме (на 6,9% выше), энергетическом метаболизме (на 5,6% выше), а также сворачивании, сортировке и деградации (на 4,9% выше), в то время как G2 был значительно обогащен. в мембранных транспортных функциях (на 22% выше).Двенадцать бактериальных белков были значительно дифференцированно многочисленны после корректировки множественного сравнения между G1 и G2 в когорте 1 (таблица S2). Белки, обогащенные G1, в основном принадлежали к L . содержат белков и участвуют в гомолактической ферментации углеводов, включая глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу (GAP-DH), пируваткиназу (PK) и лактатдегидрогеназу (LDH). Все белки, обогащенные G2, были G . vaginalis и включала периплазматический компонент системы транспорта сахара ABC типа MalE (MAL-E ABC) и альфа-1,4-глюканфосфорилазу, фермент, разлагающий крахмал и гликоген, что позволяет предположить, что G . vaginalis направляет свой метаболизм на высвобождение и поглощение внеклеточных сахаридов. Хотя многие из этих белков также были в разной степени распространены между G1 и G2 в когорте 2, они не прошли коррекцию множественного сравнения. В целом это показывает, что «основные» функциональные пути, необходимые для связанной с хозяином бактериальной жизни в FGT, включают углеводный, аминокислотный и трансляционный аппарат, в то время как нарушения мембранного транспорта и катаболизма углеводов, вероятно, важны для патогенных состояний.

Повреждение эпителия влагалища и активация иммунной системы связаны с бактериальными сообществами, несмотря на отсутствие клинических симптомов

Бактериальный дисбиоз влияет на риск заражения ВИЧ [10, 11, 24], репродуктивное здоровье [7] и активацию клеток слизистой оболочки [13], но влияние на FGT не совсем ясно. Наш анализ показал, что 69/434 (15,8%, 15 с прохождением 5% FDR) и 64/434 (14,7%, 19 с прохождением 5% FDR) белков хозяина значительно различались между профилями G1 и G2 в когорте 1 и 2, соответственно.Для когорты 2 сравнение, основанное на бактериальных группах, а не критериях оценки Ньюджента, дало более значительные различия в протеомах хозяев, как статистически (9,2% против 15,8%, P <0,05), так и по величине (5 против 6 Log 2 кратных изменений ; S1G / S1H Fig), предполагая, что состав бактериального сообщества, а не клинические критерии BV, более точно классифицирует воспаление слизистой оболочки. Это сравнение было невозможно для когорты 1, поскольку все профили G2 имели клинически определенный BV. Иерархический кластерный анализ показал, что продольные изменения профилей G1 в G2 в когорте 1 были четко различимы по двум основным ветвям белков-хозяев (S2A / S2B рис.).Белков больше в G1 (ветвь 1), связанных с развитием эпидермиса и ороговевшей оболочки, тогда как в G2 (ветвь 2) обнаружены повышенные факторы, участвующие в связывании с цитоскелетом, треониновые протеазы, участвующие в активности протеасомы, а также везикулярные компоненты и меланосома. Многие из них включали белки S100 и факторы врожденного иммунитета, важные для противомикробной защиты на основе онтологии генов (DMBT1, CADh2, S10A7, EFHD2, S10AB, S10A6, TGM3, K2C1 S10A2). Аналогичным образом, в когорте 2 иерархический кластерный анализ показал, что белки, более обильные в G1 (ветвь 1), связаны с развитием эпидермиса, структурной молекулярной активностью и ороговевшей оболочкой, тогда как белки с повышенным содержанием в G2 (ветвь 2) также включают развитие и дифференциацию эктодермы, хотя были связаны с цитоскелетной активностью (S2C / S2D фиг.).Многие из них важны для опосредованного лейкоцитами иммунитета и раневых реакций на основе их генной онтологии (A1AT, IC1, GELS, CO3, PEBP1, PRDX1, PRDX2, CO4A, ANXA8).

Семнадцать белков были в разной степени распространены в обеих когортах (рис. 3А). Белки-хозяева, более многочисленные в профилях G2, включали регуляторы апоптоза (PRDX, NDKB, CADh2) и факторы миграции лейкоцитов (PLST), в то время как профили G1 показали усиление кератинизации, развития эпидермиса и факторов ороговевшей оболочки (INVO, SPR1A) (рис. 3B).Особый интерес представляет то, что содержание INVO и SPR1A было в 14,7 и 7,2 раза ниже у женщин с микробными профилями G2 Когорты 1 и 2, соответственно. В когорте 2 показатели INVO и SPR1A были ниже у женщин с микробным профилем G2, даже если у них не был клинически диагностирован BV (рис. 3C). Известно, что эти белки действуют как каркас для слоев эпидермиса и важны для надлежащей барьерной функции [25], а иммуногистохимический анализ подтвердил присутствие INVO и SPR1A в тканях шейки матки и влагалища, где они прочно связаны с плоским эпителием и роговым слоем в тканях. здоровая ткань FGT (S3 Рис.).В совокупности эти данные показывают связь повышенной иммунной активации, апоптоза и снижения функции эпителиального барьера у женщин с G . vaginalis- преобладали в бактериальных профилях, и эти эффекты очевидны в G . vaginalis — преобладающие сообщества при отсутствии клинического диагноза.

Рис. 3. Белки вагинального эпителиального барьера значительно различаются между группами микробов и значительно ниже у Gardnerella (G2) по сравнению с Доминантные профили Lactobacillus (G1).

(A) Тепловая карта дифференциально обильных белков-хозяев, общих для когорты 1 (продольная) и когорты 2 (поперечная) на основе профилей микробиома шейки матки. (B) Функциональная аннотация дифференциально экспрессируемых белков на основе их генной онтологии. Точный тест Фишера использовался для сравнения аннотированных функций белка между G1 и G2 в обеих когортах. (C) Пониженные белки ороговевшей оболочки (инволукрин и белок, богатый малым пролином 1A) сильно коррелируют с G . vaginalis (G2), независимо от проявления клинических симптомов БВ в обеих когортах. Тест Стьюдента t использовался для сравнения содержания INVO и SPR1A между G1 и G2. БП: Биологический процесс; CC: Сотовая связь.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1005889.g003

Функциональные вариации микробиома влагалища коррелируют с эпителиальным ранением

Из-за сильной ассоциации путей развития эпителия с различными группами бактерий мы сравнили факторы ороговевшей оболочки INVO и SPR1A с бактериальными белками.Девятнадцать бактериальных белков имели сильные ассоциации по крайней мере в одном сравнении с INVO или SPR1A после поправки на множественные сравнения. Белки от л . инеров , которые положительно коррелировали с INVO и SPR1A, участвовали в путях катаболизма и энергетического метаболизма, включая гликолиз и гомолактическую ферментацию сахаров (путь Эмбдена-Мейерхоффа-Парнаса (EMP)) (рис. 4A / 4B). К ним относятся предполагаемая фруктозо-1,6-бисфосфатальдолаза (PFBA), PK, GAP-DH и LDH, а также ферритин-подобный белок (FLP), который важен для изоляции избыточного железа и предотвращения окислительного повреждения [26]. .Бактериальные белки, которые отрицательно коррелировали с INVO и SPR1A, принадлежали к альтернативным путям метаболизма сахара (путь фосфокетолазы), транспортным функциям и катаболизму аминокислот. Большинство из них принадлежало G . vaginalis (рис. 4C / 4D), включая D-ксилулозо-5-фосфат / D-фруктозо-6-фосфатфосфокетолазу (XFBP), предполагаемый сахар-связывающий секретируемый белок (P-SBSP), MAL-E ABC, внеклеточное растворенное вещество. связывающий белок (ESBP) и глициноксидаза (GOx). Мембранный белок из Prevotella sp., разделяющая гомологию последовательности с SusD-подобным (связывающим крахмал) белком, также была отрицательно связана (S4 фиг.). Также наблюдались многие ассоциации с вагинальным pH, включая отрицательные ассоциации с ферментами из L . инеров (PK, LDH, фактор удлинения tu и FLP) (S5A фиг.) И положительные ассоциации с ферментами из G . vaginalis , включая GOx, который катализирует превращение глицина в глиоксалат, аммиак и перекись водорода (S5B Рис.).Таким образом, наблюдалась четкая взаимосвязь между метаболической функцией, уровнями белка эпителиального барьера и pH влагалища, демонстрируя, что эти микробные пути могут быть важным компонентом нарушения слизистого барьера и здоровья влагалища.

Рис. 4. Бактериальные белки значительно коррелируют с маркерами вагинального эпителиального барьера.

Корреляции Спирмена между белками (A) Lactobacillus и INVO (B) белками Lactobacillus vs.SPR1A; (К) G . vaginalis белков по сравнению с INVO; (Г) Г . vaginalis белков по сравнению с SPR1A. (SPR1A: небольшой протеин, богатый пролином 1A; INVO, Involucrin) для обеих когорт. Показаны только те белки, которые прошли тестирование коррекции множественного сравнения хотя бы в одном сравнении (Bonferonni, P <0,0003).

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1005889.g004

Растворимые продукты, полученные из культуры

G . vaginalis ухудшают способность к заживлению ран.

Ассоциация бактериальных сообществ с белками целостности барьера привела нас к гипотезе о том, что способность заживления ран может поддерживаться или подавляться конкретными видами бактерий и / или их продуктами. Таким образом, мы провели классический анализ заживления ран, в котором мы культивировали соответствующую линию клеток шейки матки (HeLa CCL-2) в присутствии супернатантов, полученных из культур L . дюймов или G . vaginalis . Перед добавлением супернатантов культур рану индуцировали царапанием монослоев клеток HeLa. Инкубация поцарапанных монослоев с л . инер Надосадочная жидкость культуры не влияла на заживление ран по сравнению с контрольной инкубацией. Однако инкубация с G . Супернатанты культур vaginalis значительно снижали заживление ран через 24 часа по сравнению как с контролем, так и с л . дюймов условий (рис. 5).Эти результаты подтверждают взаимосвязь между растворимыми соединениями, продуцируемыми основными видами бактерий профилей G1 и G2, и способностью заживления ран. Это подразумевает, что эти виды являются важными компонентами или движущими силами восстановления, поддержания и нарушения эпителиального барьера в FGT.

Рис. 5. G . Растворимые продукты, производные vaginalis , ингибируют заживление ран монослоев клеток шейки матки.

(A) Типичные световые микрофотографии показывают, что царапины в монослоях клеток HeLa полностью зажили в присутствии среды NYCIII и L . инеров , супернатанты культур, в то время как монослои клеток HeLa подвергались воздействию G . vaginalis Супернатанты культур не зажили полностью или не увеличились. (B) Статистический анализ повторных экспериментов по совместному культивированию. Статистическая значимость рассчитывалась с использованием дисперсионного анализа с поправкой Бонферонни. *** P <0,001.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1005889.g005

Обсуждение

В этом исследовании мы продемонстрировали новый метапротеомный подход для одновременной оценки бактериального разнообразия, численности и функции, а также барьера хозяина и воспалительных процессов, обеспечивая понимание механизмов, имеющих отношение к женскому здоровью.Мы описали различные профили вагинального бактериального протеома, в которых преобладали Lactobacillus spp. (G1) или G . vaginalis (G2), где последний связан с BV, повышенным разнообразием сообщества и значительным отклонением от нормальной метаболической функции. Затем мы продемонстрировали, что функциональные профили бактерий были в значительной степени связаны с факторами ороговевшей оболочки в FGT, и это влияло даже при отсутствии клинического диагноза. Наконец, мы обнаружили, что преобладающие виды, идентифицированные в этом исследовании, в частности G . vaginalis и L . iners , образуют растворимые продукты, которые нарушают или поддерживают способность клеток эпителия шейки матки заживлять и закрывать раны. Следовательно, нарушение заживления ран является потенциальным механизмом, с помощью которого ключевые виды бактерий могут влиять на барьерную функцию слизистой оболочки и, следовательно, на риск заболевания и / или инфицирования ВИЧ / ИППП. Связь вагинального воспаления и воспалительных вагинальных бактерий с восприимчивостью к ВИЧ указывает на то, что нацеливание на этот механизм может привести к новым стратегиям профилактики ВИЧ.

В то время как повышенное разнообразие бактериальных сообществ связано с лучшим функционированием слизистой оболочки кишечника [27, 28], бактериальные сообщества с низким разнообразием полезны для FGT [5], где повышенное разнообразие тесно связано с BV [7]. В соответствии с предыдущими наблюдениями [5], многие женщины в когорте 2 с G . vaginalis- сообществ с преобладанием BV не имели симптомов (61%), что еще раз подтверждает тот факт, что оценка Nugent недооценивает масштабы доминирующих сообществ, отличных от Lactobacillus .Однако эффекты на эпителиальные пути хозяина, включая снижение целостности и усиление воспалительных путей, все еще были очевидны в отсутствие клинического диагноза. Lactobacillus spp. и G . vaginalis белков содержали больше растворимого протеома, чем можно было бы заключить из секвенирования гена 16S рРНК, что позволяет предположить, что эти бактерии доминируют в метаболическом ландшафте FGT.

Метагеномные исследования микробиома человека показали, что основная метаболическая функция менее изменчива, чем состав сообщества [2].В соответствии с этим мы наблюдали, что большинство назначенных белковых функций существенно не менялись, что, вероятно, представляет собой основные метаболические функции. Однако некоторые функции различаются между G1 и G2, включая усиление углеводного метаболизма, выработку энергии и функции сворачивания / сортировки в G1 для усиления мембранного транспорта и секреции внеклеточных продуктов в G2, с L . дюймов и G . vaginalis доминирует над этими ключевыми функциями.Повышенное содержание ферментов, важных для транспорта сахара и катаболизма крахмала и гликогена в G2, предполагает, что G . vaginalis может вытеснить Lactobacillus spp. для поглощения углеводных субстратов. Это согласуется с недавним исследованием, показывающим, что у женщин с БВ наблюдаются значительные изменения метаболитов в слизистой цервиковагинальной области, включая более низкие уровни углеводов, аминокислот и лактата, сопровождающиеся повышенными уровнями катаболитов аминокислот и полиаминов [29].В целом, это демонстрирует, что увеличение бактериального разнообразия связано с изменениями в основных метаболических путях, что позволяет лучше понять дисбактериоз в FGT.

Мы обнаружили, что профили G1 из обеих когорт сильно связаны с факторами ороговевшей оболочки, особенно INVO и SPR1A, которые экспрессируются в верхних слоях эпителия влагалища и шейки матки и помогают поддерживать целостность эпителия. Наша группа ранее сообщала, что повышенные уровни цервоковагинальных CD4 + Т-клеток связаны с более низкими уровнями ороговевших факторов оболочки [30], демонстрируя важную связь между целостностью вагинального эпителия и риском заражения ВИЧ.Профили G1 также были связаны с более высокими уровнями антимикробных пептидов, таких как дермцидин, который важен для защиты хозяина от микроорганизмов [31]. Для сравнения, бактериальные профили G2 коррелировали с более низкими факторами ороговевшей оболочки и эпителиального барьера, повышением цитоскелетных элементов, важных для миграции клеток, и повышением протеасомных факторов. Это согласуется с другими исследованиями, показывающими, что BV ассоциируется с активацией врожденного иммунитета и воспалительных путей в FGT, включая повышенный уровень комплемента [32], уровни протеасом [33], провоспалительные цитокины и активированные CD4 + T-клетки [13].Важно отметить, что профили бактериального протеома G2 связаны с уменьшением количества INVO и SPR1A независимо от клинического статуса BV. Это открытие демонстрирует, что современные методы, используемые для диагностики BV, вероятно, недооценивают истинную степень бактериального дисбиоза на барьерную функцию слизистой оболочки FGT, поскольку показатели Nugent Scores были плохими предикторами BV, особенно для когорты 2. Таким образом, новые методы для обнаружения и лечения G . vaginalis в FGT может помочь в снижении риска заражения ВИЧ, поддерживая целостность слизистых оболочек и эпителиального барьера и уменьшая воспаление.

Катаболические ферменты, участвующие в гомолактической ферментации глюкозы из Lactobacillus , такие как L-лактатдегидрогеназа, коррелируют с белками более высокого эпителиального барьера, в то время как мембранные переносчики, внеклеточные белки и альтернативные пути метаболизма углеводов (гетеролактические ферментативные или фосфокетолазные пути) G . vaginalis имели отрицательную корреляцию. Кроме того, GOx сильно коррелировал с повышением pH влагалища, что указывает на роль этого фермента в изменении pH влагалища во время дисбактериоза.Насколько нам известно, это первый случай, когда эти бактериальные ферменты были связаны с сигнатурами разрушения эпителия и pH влагалища. В совокупности это показывает взаимосвязь между структурой бактериального сообщества, метаболической функцией, разрушением эпителиальных белков, важных для целостности барьера, и общим состоянием влагалища.

Мы также продемонстрировали, что G . Супернатанты культур vaginalis ингибировали заживление поцарапанных монослоев клеток HeLa, в то время как L . дюймов Надосадочные жидкости культур поддерживали эффективное заживление ран. Исходя из этих данных, G . vaginalis , вероятно, является важным компонентом или потенциальным фактором, препятствующим процессу заживления ран. Признавая, что монослои клеток HeLa не полностью воспроизводят плоский эпителий или иммунную среду FGT, это, тем не менее, поддерживает заживление как основной механизм. Взятые вместе и рассматривая метапротеомные, метагеномные и модели in vitro , эти данные позволяют предположить, что G . vaginalis выделяет различные внеклеточные продукты во влагалище, которые способствуют усвоению питательных веществ, изменяют микросреду влагалища, способствуют активации врожденного иммунитета и предотвращают заживление эпителиального барьера. Будущие исследования для определения точных вовлеченных белковых путей, того, как они могут быть изменены, и более продвинутые модели животных и инженерных тканей помогут лучше расшифровать эти взаимодействия хозяина и микробиома.

Важно сравнить обсуждение преимуществ и ограничений метапротеомики по сравнению с методами на основе 16S рРНК для характеристики микробных сообществ во влагалище.Оба метода являются количественными, и было показано, что спектральный подсчет с помощью МС напрямую коррелирует с колониеобразующими единицами [21]. Преимущество 16S перед MS заключается в большем разрешении общей структуры сообщества, и хотя мы продемонстрировали высокую чувствительность для идентификации видов, которые составляли 0,1% популяции с помощью MS, 16S захватил больше общих видов бактерий. Вероятно, что больший динамический диапазон протеома по геному является большим фактором, способствующим этому наблюдению. И 16S, и MS полагаются на курируемые базы данных для идентификации видов и подвергаются тем же ограничениям в доступности и обширности библиотек.Хотя базы данных для генов 16S рРНК, вероятно, более полны, протеомные библиотеки растут и становятся все более доступными. Преимущество MS состоит в том, что он может обеспечить прямую идентификацию на уровне видов, что недостижимо с помощью высокопроизводительных методов секвенирования гена 16S рРНК. Кроме того, метапротеомный анализ выявляет функциональную и метаболическую активность бактерий, которая не обеспечивается подходами на основе 16S. Предыдущие исследования пытались смягчить это, используя МС для корреляции количества метаболитов с численностью видов [34], с помощью метагеномных исследований [35] или с помощью вычислительных методов для оценки функциональной способности бактериального сообщества на основе сигнатур гена 16S рРНК [36], но тем не менее представляют собой косвенные методы оценки функциональности бактериального сообщества.Хотя секвенирование гена 16S рРНК является популярным и хорошо подтвержденным методом изучения микробных сообществ, использование метапротеомных подходов дает дополнительные и бесценные данные о структуре сообщества, функции и воспалении хозяина для лучшего изучения взаимоотношений хозяина и бактерии.

Наши данные предоставляют новое понимание механизма того, как дисбактериоз влагалищных бактериальных сообществ может напрямую увеличивать восприимчивость хозяина к инфекции за счет разрушения эпителиальных барьеров, ингибирования заживления ран и индукции воспаления.В контексте передачи ВИЧ ингибирование заживления ран недостаточно изучено и может отражать механизмы, лежащие в основе других факторов риска ВИЧ, включая использование гормональных контрацептивов, интравагинальные методы и другие ИППП. Эти пути могут также влиять на эффективность или отзывчивость технологий профилактики других инфекций, нацеленных на слизистую оболочку, таких как микробициды или вакцины от ВИЧ. Таким образом, в этом исследовании определены функциональные конфигурации микробных сообществ, которые влияют на здоровье влагалища во время БВ, предоставлена ​​новая информация о взаимодействиях хозяин-бактерия, что позволяет в будущих экспериментах исследовать взаимоотношения хозяина и микробов в ГПГ, которые могут иметь важные последствия для здоровья женщин.

Материалы и методы

Заявление об этике

Все женщины, участвовавшие в этом исследовании, предоставили письменное информированное согласие. Исследования были одобрены Комитетом по рассмотрению субъектов Вашингтонского университета, Кенийским институтом медицинских исследований (KEMRI), Комитетом субъектов Иллинойского университета в Чикаго и Советом по этике исследований Университета Манитобы.

Когорты исследования

Группа исследования 1 (Кения).

Это исследование включало лонгитюдные образцы и данные, собранные у кенийских партнеров-женщин из серодискордантных пар ВИЧ-1, включенных в исследование Partners PrEP [37].За серонегативными партнерами по ВИЧ-1 наблюдали во время ежемесячных посещений, которые включали подробную оценку их поведения и истории болезни. Для этого исследования мы определили архивные образцы мазков из шейки матки от 10 женщин в группе плацебо исследования Partners PrEP, собранные в 2 временных точках: один во время посещения, когда участник дал положительный результат на BV (оценка Ньюджента 7-10), и один в момент посещения. посещение, где участник дал отрицательный результат на BV (оценка Nugent 0–3). Критерии исключения включали тех, у кого были выявлены язвы половых органов в результате самоотчета или физического осмотра во время посещения для сбора образцов.Все женщины оставались отрицательными на ВИЧ-1 на протяжении всего исследования. Женщины также были обследованы на исходном уровне на наличие бактериальных ИППП, трихомонадного вагинита , Neisseria gonorrhoeae и Chlamydia trachomatis и пролечены в случае положительного результата.

Когорта исследования 2 (Северная Америка).

Всего 31 женщина была включена в это исследование из Университета Иллинойса как часть когорты проекта UIC Wish, набранной для исследований по профилактике ВИЧ. Возраст участников был от 18 до 47 лет, они не принимали никаких гормональных контрацептивов и воздерживались от половых сношений, вагинальных препаратов / кремов или спринцеваний в течение как минимум 24 часов до сбора образцов.Этническая принадлежность была преимущественно черной / неиспаноязычной (n = 27), с небольшим количеством женщин европеоидной расы (n = 3), азиатки (n = 2) и латиноамериканского происхождения (n = 1). Все участники прошли тестирование на ВИЧ, Trichomonas vaginitis , Neisseria gonorrhoeae и Chlamydia trachomatis из мазков из влагалища, взятых во время сбора, и были исключены при положительном результате.

Сбор образцов цервиковагинального тракта

Когорта исследования 1.

Copan Floqswabs (Copan Diagnostics, Murrieta CA, USA) использовали для сбора вагинальных образцов, и образцы хранили замороженными при -80 ° C до анализа.Среднее количество дней между сбором образца вагинального мазка составило 334 +/- 501 день.

Когорта исследования 2.

Образцы цервиковагинального лаважа (CVL) получали путем закапывания 10 мл физиологического раствора на поверхность свода влагалища и эктоцервикса. Затем солевой лаваж повторно набирали (8–10 мл) с помощью того же шприца, которым он был закапан. Все образцы немедленно хранили на влажном льду, а затем замораживали при -80 ° C в течение 1 часа после сбора образцов.

Критерии бактериального вагиноза.

Цервиковагинальные образцы были использованы для идентификации BV с использованием критериев оценки Nugent. Вкратце, окрашенные по Граму мазки оценивали на отсутствие Lactobacillus (0–4 балла), наличие морфотипов Gardnerella и Bacteroides (0–4) и наличие изогнутых палочек с грамм-переменной (0–2). для общего балла 0–10, где 0–3 — здоровое состояние, 4–6 — среднее, а 7–10 — диагностическое для БВ. Для когорты 2 также были собраны критерии Амселя, включая влагалищный pH, ключевые клетки на влажном образце и положительный тест на запах, которые были включены для положительной классификации на BV (любые 3 из 4 критериев).

Пробоподготовка для масс-спектрометрии

Вагинальные мазки элюировали 2 раза по 250 мкл промывки в PBS (pH 7,0). Затем элюаты мазков (Когорта 1) или образцы CVL (Когорта 2) центрифугировали в пробирках SpinX со скрепленным фриттованным дном (Corning, Corning, NY) и определяли содержание белка с помощью анализа BCA (Novagen, Bilerica, MA). Затем белки денатурировали, восстанавливали, алкилировали, расщепляли до пептидов и готовили для масс-спектрометрии, как описано ранее [38]. Подробные методы этого процесса доступны в разделе «Методы S1».

Масс-спектрометрический анализ

Вкратце, образцы пептидов вводили в систему нано-проточной ЖХ (Easy nLC, Thermo Fisher), подключенную к масс-спектрометру LTQ Orbitrap Velos (Thermo Fisher), и анализировали без использования меток, как описано ранее [38]. Поиск идентичности пептидов проводился с помощью Mascot v2.4.0 (Matrix Science) в вручную созданной базе данных, состоящей из баз данных SwissProt Human & Bacteria (июнь 2015 г.) и UniProtKB / Trembl All Bacteria (август 2015 г.).База данных приманок была включена для определения уровня ложного обнаружения. Идентификация белков была подтверждена с помощью Scaffold (v 4.4.1, Proteome Software) с доверительными порогами, установленными на 95% достоверности идентификации белка, требующей не менее 2 уникальных пептидов и 80% достоверности идентификации пептидов. Для количественного определения белков использовалась комбинация методов без меток: спектральный подсчет (для микробных белков и кластеризации бактериального разнообразия, см. Ниже) и количественный анализ площади под кривой (программное обеспечение Progenesis LC-MS (v4.0, нелинейная динамика)). Критерии для определения присутствия микробных белков включали те, которые содержали по меньшей мере 1 пептид в одном образце и по меньшей мере 2 пептида на белок во всех образцах. Эти параметры привели к показателю ложного обнаружения ниже 3,1% на основе результатов поиска, созданных с помощью базы данных приманок, созданной Mascot. Для последнего только белки, которые имели среднюю ковариацию <25% (575 белков), как было определено путем измерения стандартного эталонного образца с 10 интервалами выборки (всего 7 раз), были использованы в последующем анализе для исключения белков с более высокая вариативность технических измерений.Подробные сведения о настройках прибора для жидкостной хроматографии и масс-спектрометрии описаны ранее [38].

Анализ протеомных данных

Протеом человека.

Значения относительного содержания белка были получены путем деления на среднюю интенсивность по всем образцам с последующим логарифмическим преобразованием (основание 2). Графические представления протеомных данных были созданы в R. Дифференциально многочисленные белки были сгруппированы с использованием неконтролируемого среднего сцепления и коэффициента корреляции Пирсона в качестве показателя расстояния.Полный список белков-хозяев, обнаруженных в этом исследовании, доступен в наборе данных S1.

Микробный протеом.

Численность микробов рассчитывалась путем суммирования нормализованных общих спектральных значений для всех белков, связанных с родом / видом. Неконтролируемая иерархическая связь со средними евклидовыми расстояниями была выполнена в MATLAB с использованием пропорциональной численности микробов в каждом образце, а составные гистограммы, созданные в аннотациях числа R.K, были присвоены с помощью GhostKOALA для получения информации о категории KEGG 29 .Назначения онтологий KEGG (KO) были настроены вручную, чтобы удалить 7 категорий, связанных с функциями на уровне организма, и 1 общую категорию «Обзор». Все белки, относящиеся к этим 8 категориям, были связаны как минимум с одной другой категорией. Среднее количество категорий KO, с которыми связан каждый уникальный белок, составляло 1,97 при максимальном количестве 7. Кумулятивная функциональная распространенность для каждой категории была рассчитана путем суммирования распространенности всех связанных белков, и белки, принадлежащие к нескольким категориям, вносили вклад в каждую из связанных.Полный список бактериальных белков, обнаруженных в этом исследовании, доступен в наборе данных S2, а спектральные подсчеты бактериальных белков доступны в наборе данных S3.

экстракция ДНК и секвенирование гена 16S рРНК.

Полную геномную ДНК из образцов элюированного мазка (когорта 1) или CVL (когорта 2) экстрагировали с использованием набора DNeasy Blood and Tissue Kit (Qiagen, Валенсия, Калифорния) с модификациями для усиления лизиса, как описано ранее [39]. Лаборатория микробиомного анализа в Университете штата Аризона выполнила секвенирование гена 16S рРНК области V3 – V4 с использованием платформы для секвенирования Illumina MiSeq, а последовательности были проанализированы с помощью программного пакета QIIME [40].Полная информация об извлечении ДНК и анализе последовательности доступна в разделе «Методы S1». Все данные о последовательностях депонированы в NCBI SRA под регистрационным номером BioProject PRJNA317390.

Анализ проводящих путей и биофункциональный анализ

Биологические / молекулярные функции и клеточные компоненты были аннотированы на основе генных онтологий с использованием ресурса DAVID Bioinformatics Resource (v6.7) [41], который вычисляет модифицированное значение Fisher Exact P для определения вероятности того, что связь между каждым белком в набор данных и функциональный путь случайны.Функциональными категориями считались те, у которых значения P <0,05 (скорректировано по Бенджамини Хохбергу) и по крайней мере 3 белка были выбраны как положительные ассоциации.

Клеточные линии, бактериальные штаммы и условия культивирования

клеток HeLa (ATCC CCL-2) были получены в качестве подарка из лаборатории доктора Шиу-Лок Ху (Вашингтонский университет) и поддерживались в среде Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM) с добавлением 4,5 г / л глюкозы, л. -глютамин, 10% (об. / об.) фетальная бычья сыворотка (Corning) и 1% (об. / об.) раствор пенициллина / стрептомицина / амфотерицина B (Gibco).Клетки HeLa инкубировали при 37 ° C в атмосфере воздух / 5% CO 2 . Gardnerella vaginalis ATCC 14018 и Lactobacillus iners ATCC 55195 были получены из Американской коллекции типовых культур и поддерживались с использованием двухслойной среды HBT (BD) и жидкой среды NYCIII с инкубацией при 37 ° C с воздухом / 5% CO 2 атмосфер. Замороженные исходные продукты хранили в 20% (об. / Об.) Глицерине при -80 ° C.

Ранозаживляющая проба

Чтобы оценить влияние различных бактерий на способность эпителиальных клеток шейки матки заживлять раны, мы использовали хорошо зарекомендовавший себя in vitro скретч-анализ [42].Чтобы подготовить живые бактерии и супернатанты культур для анализа заживления ран, ночные культуры л . дюймов и G . vaginalis в среде NYCIII выращивали, как описано выше. Лунки 24-луночного планшета для тканевых культур (Corning) первоначально засевали 50 000 клеток HeLa в объеме 500 мкл DMEM и инкубировали при 37 ° C в атмосфере 5% CO 2 до образования монослоя конфлюэнтных клеток. Затем монослои в каждой лунке царапали с помощью стерильного наконечника пипетки P200.Затем в лунки добавляли живые бактерии, супернатанты бактериальных культур или контрольные растворы. Изображения в пяти контрольных точках на лунку были получены с помощью микроскопа Nikon Eclipse TS100, оснащенного камерой Nikon DS-Ri1, и размер царапины в каждой контрольной точке был проанализирован вручную с помощью программного обеспечения ImageJ. Размер раны определяли сразу после начала (t = 0) эксперимента, а затем снова через 24 часа (t = 24) инкубации при 37 ° C в атмосфере воздуха / 5% CO 2 .Дополнительная информация об исследованиях заживления ран доступна в разделе «Методы S1».

Статистический анализ.

Независимые (U-критерий Манна-Уитни) или парные пробы t- использовали для нормализованных протеомных данных для статистических сравнений. Если не указано иное, значимые изменения были определены как изменения со значением P ниже 0,05 после корректировки на частоту локального ложного обнаружения и множественных сравнений [43]. Для категориальных переменных использовались критерии хи-квадрат.Для анализа заживления ран была рассчитана разница между размером царапины при t = 0 и t = 24 в каждой контрольной точке и нормализована к начальному размеру царапины для определения процента раны, которая зажила через 24 часа. ANOVA с поправкой Бонферрони проводился в GraphPad Prism (GraphPad).

Дополнительная информация

S1 Рис. Видовое разнообразие вагинальных бактерий, обилие белка и взаимосвязь с экспрессией белка хозяина, обнаруженная с помощью масс-спектрометрии.

(A) Виды бактерий и разнообразие протеомов для когорты 1. В большинстве сообществ G1 доминировал L . дюймов , а G . vaginalis , P . amnii , Megasphaera sp. И другие доминировали в сообществах G2. (B) Виды бактерий и разнообразие протеомов для когорты 2. Сообщества G1 преобладали либо L . дюймов , л . crispatus , но также имел в наличии L . gasseri и L . jensenii . В сообществах G2 преобладали G . vaginalis . (C) Разнообразие Шеннона обнаружено для когорты 1. Группа G2 всегда имела более высокое разнообразие, чем группа G1. (D) Разнообразие Шеннона обнаружено для когорты 2. Не было разницы в разнообразии между группами G1 и G2. (E / F) Общие различия в обилии бактериальных протеомов у женщин с G . vaginalis или л . iners бактериальный протеомный профиль для когорты 1 (E) и когорты 2 (F) . Эти графики показывают уровни бактериального белка (ось y) как функцию ранга численности (ось x) в порядке убывания. Показаны медианные уровни (log10), и тесты Стьюдента t- (когорта 1: парный t-критерий, параметрический; когорта 2: непарный t-критерий, параметрический) были использованы для определения статистических различий. Г . Профили с преобладанием vaginalis всегда имели повышенную белковую нагрузку по сравнению с профилями, в которых преобладала Lactobacillus .(G / H) графики Volcano, изображающие различия в экспрессии белков-хозяев с использованием клинического статуса BV (G) или профиля бактериального сообщества (H) . Ось Y графика вулкана обозначает статистическую значимость, а ось абсцисс — кратное изменение (FC). Сравнение профилей сообществ G1 и G2, а не критериев BV, дало более статистически значимые различия между протеомом хозяина.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1005889.s001

(TIF)

S2 Фиг.Пути воспаления слизистой оболочки влагалища у женщин из когорты 1 и когорты 2, связанные с составом бактериального сообщества.

Тепловые карты дифференциально обильных белков-хозяев ( P <0,05) в цервиковагинальном секрете женщин на основе вагинальных бактериальных сообществ. (A) Дифференциально обильные белки-хозяева для когорты 1; (B) Функциональная аннотация дифференциально экспрессируемых белков на основе их генной онтологии для когорты 1. (C) Тепловая карта дифференциально распространенных белков-хозяев для когорты 2; (D) Функциональная аннотация дифференциально экспрессируемых белков на основе их генной онтологии для когорты 2.БП: Биологический процесс; CC: Сотовый компонент; MF: Молекулярная функция.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1005889.s002

(TIF)

S3 Рис. Иммуногистохимические изображения белков эпителиального барьера инволюкрина и небольшого богатого пролином белка 1A во влагалище и шейке матки.

Иммуногистохимический анализ ткани шейки матки и влагалища выявил выраженную экспрессию INVO и SPR1A в верхних слоях плоского эпителия шейки матки и влагалища, причем оба показали связь с цитоплазмой и мембраной ядра.Белок не был обнаружен в железистых клетках шейки матки / эндоцервикса.

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1005889.s003

(TIF)

S5 Рис. Бактериальные белки, которые значительно коррелируют с pH в цервиковагинальном эпителии.

Четыре L . iners белков отрицательно коррелировали с pH, включая лактатдегидрогеназу (LDH) (A) и три G . vaginalis белков положительно коррелировали с pH, включая глициноксидазу (GOx) (B) .

https://doi.org/10.1371/journal.ppat.1005889.s005

(TIFF)

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить участников исследования Partners PrEP и проекта UIC HIV Project Wish.

Вклад авторов

  1. Задумал и спроектировал эксперименты: ADB NRK RM JL.
  2. Проведены эксперименты: ASZ IYX KB GW SM.
  3. Проанализированы данные: ASZ IYX KB GW SM NRK ADB KA LR DAL LRM CRC RMN.
  4. Предоставленные реагенты / материалы / инструменты анализа: ADB NRK KA DAL.
  5. Написал документ: ADB ASZ NRK IYX LRM.

Ссылки

  1. 1.
    Костелло Е.К., Лаубер К.Л., Хамади М., Фирер Н., Гордон Дж. И., Найт Р. Вариации бактериального сообщества в средах обитания человеческого тела в пространстве и времени. Наука. 2009. 326 (5960): 1694–7. pmid: 19892944
  2. 2.
    Проект «Микробиом человека» C. Структура, функции и разнообразие здорового микробиома человека.Природа. 2012. 486 (7402): 207–14. pmid: 22699609
  3. 3.
    Аручева А., Гарити Д., Саймон М., Шотт С., Фаро Дж., Симоэс Дж. А. и др. Факторы защиты от вагинальных лактобацилл. Am J Obstet Gynecol. 2001. 185 (2): 375–9. pmid: 11518895
  4. 4.
    Фредрикс Д. Н., Фидлер Т. Л., Марраццо Дж. М.. Молекулярная идентификация бактерий, связанных с бактериальным вагинозом. N Engl J Med. 2005; 353 (18): 1899–911. pmid: 16267321
  5. 5.
    Равель Дж., Гайер П., Абдо З., Шнайдер Г.М., Кениг ССК, МакКулл С.Л. и др.Микробиом влагалища женщин репродуктивного возраста. Proc Natl Acad Sci. 2011; 108 (приложение 1): 4680–7. pmid: 20534435
  6. 6.
    Kenyon C, Colebunders R, Crucitti T. Глобальная эпидемиология бактериального вагиноза: систематический обзор. Am J Obstet Gynecol. 2013. 209 (6): 505–23. pmid: 23659989
  7. 7.
    Сринивасан С., Хоффман Н.Г., Морган М.Т., Матсен Ф.А., Фидлер Т.Л., Холл Р.В. и др. Бактериальные сообщества у женщин с бактериальным вагинозом: филогенетический анализ с высоким разрешением показывает взаимосвязь микробиоты с клиническими критериями.ПлоС один. 2012; 7 (6): e37818. pmid: 22719852
  8. 8.
    Фетерс К.А., Фэрли К.К., Хокинг Д.С., Гуррин Л.С., Брэдшоу К.С. Факторы сексуального риска и бактериальный вагиноз: систематический обзор и метаанализ. Clin Infect Dis. 2008. 47 (11): 1426–35. pmid: 18947329
  9. 9.
    Шин Л.Ю., Каул Р. Оставайтесь с флорой: поддержание здоровья влагалища как возможный путь предотвращения заражения вирусом иммунодефицита человека. Журнал инфекционных болезней. 2008. 197 (10): 1355–7. pmid: 18444792
  10. 10.Буве А., Джесперс В., Круситти Т., Фичорова Р.Н. Микробиота влагалища и восприимчивость к ВИЧ. СПИД. 2014. 28 (16): 2333–44. pmid: 25389548
  11. 11.
    Аташили Дж., Пул С., Ндумбе П.М., Адимора А.А., Смит Дж. С.. Бактериальный вагиноз и заражение ВИЧ: метаанализ опубликованных исследований. СПИД. 2008. 22 (12): 1493–501. pmid: 18614873
  12. 12.
    Burgener A, McGowan I, Klatt NR. Взаимодействие ВИЧ и слизистого барьера: последствия для передачи и патогенеза.Современное мнение в иммунологии. 2015; 36: 22–30. pmid: 26151777
  13. 13.
    Anahtar MN, Byrne EH, Doherty KE, Bowman BA, Yamamoto HS, Soumillon M, et al. Цервиковагинальные бактерии являются основным модулятором воспалительных реакций хозяина в женских половых путях. Иммунитет. 2015; 42 (5): 965–76. pmid: 25992865
  14. 14.
    Митчелл С., Марраццо Дж. Бактериальный вагиноз и цервиковагинальный иммунный ответ. Am J Reprod Immunol. 2014. 71 (6): 555–63. pmid: 24832618
  15. 15.McClelland RS, Balkus JE, Lee J, Anzala O, Kimani J, Schwebke J, et al. Рандомизированное испытание периодического предполагаемого лечения высокими дозами интравагинального метронидазола и миконазола для предотвращения вагинальных инфекций у ВИЧ-отрицательных женщин. Журнал инфекционных болезней. 2015; 211 (12): 1875–82. pmid: 25526757
  16. 16.
    Макклелланд Р.С., Ричардсон Б.А., Хассан В.М., Чохан В., Лаврейс Л., Мандалия К. и др. Улучшение здоровья влагалища у кенийских женщин, подверженных риску заражения вирусом иммунодефицита человека типа 1: результаты рандомизированного исследования.Журнал инфекционных болезней. 2008. 197 (10): 1361–8. pmid: 18444793
  17. 17.
    Уилсон Дж. Управление рецидивирующим бактериальным вагинозом. Инфекции, передающиеся половым путем. 2004. 80 (1): 8–11. pmid: 14755028
  18. 18.
    Мэтьюсон Н.Д., Дженк Р., Мэтью А.В., Кенигскнехт М., Ханаш А., Тубай Т. и др. Метаболиты кишечного микробиома модулируют повреждение эпителиальных клеток кишечника и смягчают реакцию «трансплантат против хозяина». Nat Immunol. 2016; 17 (5): 505–13. pmid: 26998764
  19. 19.Турман А.Р., Дончел Г.Ф. Врожденный иммунитет и воспалительная реакция на Trichomonas vaginalis и бактериальный вагиноз: связь с заражением ВИЧ. Am J Reprod Immunol. 2011. 65 (2): 89–98. pmid: 20678168
  20. 20.
    Петрова М.И., ван ден Брук М., Бальзарини Дж., Вандерлейден Дж., Лебеер С. Микробиота влагалища и ее роль в передаче и инфицировании ВИЧ. Обзоры микробиологии FEMS. 2013; 37 (5): 762–92. pmid: 23789590
  21. 21.
    Tanca A, Palomba A, Salvatore P, Deligios M, Fraumene C, Manghina V и др.Простой и эффективный аналитический конвейер для характеристики метапротеома. Микробиом. 2014; 2 (49).
  22. 22.
    Zhou X, Brown CJ, Abdo Z, Davis CC, Hansmann MA, Joyce P и др. Различия в составе микробных сообществ влагалища у здоровых женщин европеоидной расы и темнокожих женщин. Журнал ISME. 2007. 1 (2): 121–33. pmid: 18043622
  23. 23.
    Brotman RM, Klebanoff MA, Nansel TR, Yu KF, Andrews WW, Zhang J, et al. Бактериальный вагиноз оценивали с помощью окрашивания по Граму и снижения колонизационной устойчивости к случайным гонококковым, хламидийным и трихомональным генитальным инфекциям.Журнал инфекционных болезней. 2010. 202 (12): 1907–15. pmid: 21067371
  24. 24.
    Коэн Ч. Р., Лингаппа Дж. Р., Баетен Дж. М., Нгайо Миссури, Шпигель Калифорния, Хонг Т. и др. Бактериальный вагиноз, связанный с повышенным риском передачи ВИЧ-1 от женщины мужчине: проспективный когортный анализ среди африканских пар. PLoS Med. 2012; 9 (6): e1001251. pmid: 22745608
  25. 25.
    Канди Э., Шмидт Р., Мелино Г. Роговой конверт: модель гибели клеток в коже. Обзор природы Молекулярно-клеточная биология.2005. 6 (4): 328–40. pmid: 15803139
  26. 26.
    Смит JL. Физиологическая роль ферритиноподобных соединений в бактериях. Crit Rev Microbiol. 2004. 30 (3): 173–85. pmid: 154

  27. 27.
    Тернбо П.Дж., Хамади М., Яцуненко Т., Кантарел Б.Л., Дункан А., Лей Р.Э. и др. Основной микробиом кишечника у тучных и худых близнецов. Природа. 2009. 457 (7228): 480–4. pmid: 1
    04
  28. 28.
    Qin J, Li R, Raes J, Arumugam M, Burgdorf KS, Manichanh C и др. Каталог микробных генов кишечника человека, созданный путем метагеномного секвенирования.Природа. 2010. 464 (7285): 59–65. pmid: 20203603
  29. 29.
    Сринивасан С., Морган М.Т., Фидлер Т.Л., Джукович Д., Хоффман Н.Г., Рафтери Д. и др. Метаболические признаки бактериального вагиноза. mBio. 2015; 6 (2).
  30. 30.
    Арнольд К. Б., Бургенер А., Бирс К., Ромас Л., Данфи Л. Дж., Шахаби К. и др. Повышенные уровни воспалительных цитокинов в женских половых путях связаны с измененной экспрессией протеаз, белков слизистого барьера и притоком чувствительных к ВИЧ клеток-мишеней.Иммунология слизистой оболочки. 2015; 9 (1): 194–205. pmid: 26104913
  31. 31.
    Буриан М., Шиттек Б. Секреты действия дермцидина. Int J Med Microbiol. 2015. 305 (2): 283–6. pmid: 25596890
  32. 32.
    Cruciani F, Wasinger V, Turroni S, Calanni F, Donders G, Brigidi P и др. Профили протеомов влагалищных жидкостей у женщин, пораженных бактериальным вагинозом, и здоровые контрольные: результаты лечения рифаксимином. J Antimicrob Chemother. 2013. 68 (11): 2648–59. pmid: 23798671
  33. 33.Боргдорф Х., Гаутам Р., Армстронг С.Д., Ся Д., Ндайисаба Г.Ф., ван Тейлинген Н.Х. и др. Дисбиоз цервиковагинального микробиома связан с протеомными изменениями, связанными с изменениями цервиковагинального слизистого барьера. Иммунология слизистой оболочки. 2015; 9 (3): 621–33. pmid: 26349657
  34. 34.
    Сринивасан С., Морган М.Т., Фидлер Т.Л., Джукович Д., Хоффман Н.Г., Рафтери Д. и др. Метаболические признаки бактериального вагиноза. mBio. 2015; 6 (2): e00204–15. pmid: 25873373
  35. 35.
    Gill SR, Pop M, DeBoy RT, Eckburg PB, Turnbaugh PJ, Samuel BS и др.Метагеномный анализ микробиома дистального отдела кишечника человека. Наука. 2006. 312 (5778): 1355–59. pmid: 16741115
  36. 36.
    Лангиль М.Г., Заневельд Дж., Капорасо Дж. Дж., Макдональд Д., Найтс Д., Рейес Дж. А. и др. Прогнозирующее функциональное профилирование микробных сообществ с использованием последовательностей маркерного гена 16S рРНК. Биотехнология природы. 2013. 31 (9): 814–21. pmid: 23975157
  37. 37.
    Бэтен Дж. М., Доннелл Д., Ндасе П., Муго Н. Р., Кэмпбелл Дж. Д., Вангиши Дж. И др. Антиретровирусная профилактика для профилактики ВИЧ у гетеросексуальных мужчин и женщин.N Engl J Med. 2012. 367 (5): 399–410. pmid: 22784037
  38. 38.
    Бирс К., Арнольд КБ, Новак Р.М., МакКорристер С., Шоу С., Вестмакотт Г.Р. и др. Молекулярные признаки иммунной активации и ремоделирования эпителиального барьера усиливаются во время лютеиновой фазы менструального цикла: последствия для восприимчивости к ВИЧ. Журнал вирусологии. 2015. 89 (17): 8793–805. pmid: 26085144
  39. 39.
    Зевин А.С., Риттманн Б.Е., Краймальник-Браун Р. Источник инокулята определяет структуру бактериального сообщества Synechocystis sp.Фотобиореакторы на базе PCC6803. Исследования водорослей. 2016; 13: 109–15.
  40. 40.
    Caporaso JG, Kuczynski J, Stombaugh J, Bittinger K, Bushman FD, Costello EK, et al. QIIME позволяет анализировать данные секвенирования сообщества с высокой пропускной способностью. Природные методы. 2010. 7 (5): 335–6. pmid: 20383131
  41. 41.
    Хуанг да В., Шерман Б.Т., Лемпицки Р.А. Систематический и комплексный анализ больших списков генов с использованием ресурсов биоинформатики DAVID. Протоколы природы. 2009. 4 (1): 44–57. pmid: 1

    56
  42. 42.Liang CC, Park AY, Guan JL. Царапина in vitro: удобный и недорогой метод анализа миграции клеток in vitro. Протоколы природы. 2007. 2 (2): 329–33. pmid: 17406593
  43. 43.
    Бенджамини Ю., Хохберг Ю. Контроль скорости обнаружения ложных сведений — практичный и эффективный подход к множественному тестированию. Журнал Королевского статистического общества. 1995. 57 (1): 289–300.

Протозойные инфекции мочеполовой системы

Цели обучения

  • Определите наиболее распространенный простейший патоген, вызывающий инфекции репродуктивной системы
  • Обобщите важные характеристики трихомониаза

Только один крупный вид простейших вызывает инфекции мочеполовой системы. Трихомониаз , или «трихомонад», является наиболее распространенной невирусной ИППП и вызывается жгутиковыми простейшими. Trichomonas vaginalis . T. vaginalis имеет волнообразную мембрану и, как правило, имеет амебовидную форму, когда прикрепляется к клеткам влагалища. В культуре имеет овальную форму.

T. vaginalis обычно встречается в нормальной микробиоте влагалища. Как и другие вагинальные патогены, он может вызывать вагинит , когда нарушается нормальная микробиота.Он находится только в виде трофозоитов и не образует цист. T. vaginalis может прикрепляться к клеткам с использованием адгезинов , таких как липогликанов ; он также имеет другие факторы вирулентности клеточной поверхности, включая тетраспанинов , которые участвуют в клеточной адгезии, подвижности и проникновении в ткани. Кроме того, T. vaginalis способен фагоцитировать другие микробы нормальной микробиоты, способствуя развитию дисбаланса, благоприятного для инфекции.

Трихомониаз может развиться как у мужчин, так и у женщин. Мужчины обычно протекают бессимптомно, и, хотя у женщин симптомы чаще развиваются, они также часто протекают бессимптомно. Когда симптомы все же возникают, они характерны для уретрита. Мужчины испытывают зуд, раздражение, выделения из полового члена и жжение после мочеиспускания или эякуляции. Женщины страдают дизурией; зуд, жжение, покраснение и болезненность гениталий; и выделения из влагалища. Инфекция также может распространиться на шейку матки.Инфекция увеличивает риск передачи или заражения ВИЧ и связана с такими осложнениями беременности, как преждевременные роды.

Микроскопическая оценка влажных оправ — недорогой и удобный метод диагностики, но чувствительность этого метода невысока. Тестирование амплификации нуклеиновой кислоты (NAAT) является предпочтительным из-за его высокой чувствительности. Использование влажных креплений, а затем NAAT для тех, у кого изначально был отрицательный результат теста, является одним из вариантов повышения чувствительности. Образцы для NAAT могут быть получены с использованием образцов мочи, влагалища или эндоцервикального канала для женщин и с использованием мазков мочи и уретры для мужчин.Также можно использовать другие методы, такие как OSOM Trichomonas Rapid Test (иммунохроматографический тест, выявляющий антиген) и тест ДНК-зонда для нескольких видов, связанных с вагинитом (тест Affirm VPII Microbial Identification Test ). T. vaginalis иногда выявляется при тесте Папаниколау , но это не считается диагностическим из-за высокого уровня ложноположительных и отрицательных результатов. Рекомендуемое лечение трихомониаза — пероральный прием метронидазола или тинидазола .Следует лечить и сексуальных партнеров.

Рисунок 1. Trichomonas vaginalis виден на этом окрашенном по Граму образце. (кредит: модификация работы Американского общества микробиологов)

Подумай об этом

  • Каковы симптомы трихомониаза?

ИППП и конфиденциальность

Для многих ИППП обычным явлением является контакт и лечение половых партнеров пациента. Это особенно важно, когда появилось новое заболевание, например, когда ВИЧ стал более распространенным в 1980-х годах.Но чтобы связаться с половыми партнерами, необходимо получить их личную информацию от пациента. Это вызывает сложные вопросы. В некоторых случаях предоставление информации может быть неудобным или затруднительным для пациента, даже если сокрытие такой информации может подвергнуть риску их сексуального партнера (партнеров).

Юридические соображения еще больше усложняют такие ситуации. Закон о переносимости и подотчетности медицинского страхования (HIPPA), принятый в 1996 г., устанавливает стандарты защиты информации о пациентах.Он требует, чтобы компании, использующие медицинскую информацию, например страховые компании и поставщики медицинских услуг, соблюдали строгую конфиденциальность записей пациентов. Таким образом, контакт с сексуальными партнерами пациента может нарушить его права на неприкосновенность частной жизни, если в результате выяснится диагноз пациента.

Что важнее с этической точки зрения: право пациента на неприкосновенность частной жизни или право сексуального партнера знать, что он может подвергаться риску заболевания, передающегося половым путем? Зависит ли ответ от тяжести заболевания или правила универсальны? Предположим, врач знает личность сексуального партнера, но пациент не хочет, чтобы с ним контактировали.Было бы нарушением правил HIPPA связаться с человеком без согласия пациента?

Вопросы, касающиеся конфиденциальности пациентов, становятся еще более сложными при работе с несовершеннолетними пациентами. Подростки могут неохотно обсуждать свое сексуальное поведение или здоровье с медицинским работником, особенно если они считают, что медицинские работники расскажут об этом своим родителям. Из-за этого многие подростки рискуют получить нелеченую инфекцию или лишиться информации, чтобы защитить себя и своих партнеров.С другой стороны, родители могут чувствовать, что имеют право знать, что происходит с их ребенком. Как с этим должны справиться врачи? Следует ли всегда говорить родителям, даже если подросток хочет конфиденциальности? Влияет ли это на то, как врач должен обращаться с уведомлением сексуального партнера?

Клиническое направление: Надя, Разрешение

Этот пример продолжает историю Нади, начатую в книге «Анатомия и нормальная микробиота урогенитального тракта и бактериальные инфекции репродуктивной системы».

Вагинальный кандидоз обычно лечат с использованием местных противогрибковых препаратов, таких как бутоконазол, миконазол, клотримазол, тиконозол, нистатин или пероральный флуконазол. Однако важно соблюдать осторожность при выборе лечения для использования во время беременности. Врач Нади рекомендовал лечение клотримазолом наружно. Этот препарат классифицируется FDA как препарат категории B для использования во время беременности, и, похоже, нет никаких доказательств вреда, по крайней мере, во втором или третьем триместре беременности.Основываясь на конкретной ситуации Нади, ее врач посчитал, что это подходит для очень краткосрочного использования, даже если она все еще находилась в первом триместре. После семидневного курса лечения грибковая инфекция Нади прошла. Она продолжила нормальную беременность и через восемь месяцев родила здорового ребенка.

Более высокий уровень гормонов во время беременности может изменить типичный состав микробиоты и баланс во влагалище, что приведет к высокому уровню инфекций, таких как кандидоз или вагиноз.Эффективность местного лечения составляет 80–90%, и лишь небольшое количество случаев приводит к рецидивирующим или стойким инфекциям. В этих случаях обычно эффективно более длительное или прерывистое лечение.

Грибковые и простейшие инфекции репродуктивного тракта

В таблице 1 приведены наиболее важные признаки кандидоза и трихомониаза.

Культура

Таблица 1. Грибковые и простейшие инфекции репродуктивного тракта
Болезнь Возбудитель Признаки и симптомы Трансмиссия Диагностические тесты Противомикробные препараты
Трихомониаз Trichomonas vaginalis Уретрит, выделения из влагалища или полового члена; покраснение или болезненность женских половых органов Сексуальный контакт Влажные образцы, NAAT образцов мочи или влагалища; Экспресс-тест на трихомонады OSOM, Подтвердите; Тест на идентификацию микроорганизмов VPII Метронидазол, тинидазол
Вагинальный кандидоз (дрожжевая инфекция) Candida spp., особенно C. albicans дизурия; жжение во влагалище, зуд, выделения Передается половым путем, но обычно вызывает оппортунистические инфекции только после иммуносупрессии или нарушения микробиоты влагалища , тест на идентификацию микроорганизмов с подтверждением VPII Флуконазол, миконазол, клотримазол, тиоконазол, нистатин

Пройдите онлайн-викторину для обзора инфекций, передаваемых половым путем.

Ключевые концепции и краткое изложение

  • Трихомониаз — распространенная ИППП, вызываемая Trichomonas vaginalis .
  • T. vaginalis часто встречается в нормальной микробиоте на низких уровнях.
  • Трихомониаз часто протекает бессимптомно. При развитии симптомов трихомониаз вызывает дискомфорт при мочеиспускании, раздражение, зуд, жжение, выделения из полового члена (у мужчин) и выделения из влагалища (у женщин).
  • Трихомониаз лечится антифлагеллятными препаратами тинидазолом и метронидазолом.

Множественный выбор

Какая единственная распространенная инфекция половых путей вызывается простейшими?

  1. гонорея
  2. хламидиоз
  3. трихомониаз
  4. кандидоз

Показать ответ

г.Трихомониаз — единственная распространенная инфекция половых путей, вызываемая простейшими.

Какой тест предпочтительнее для обнаружения T. vaginalis из-за его высокой чувствительности?

  1. NAAT
  2. мокрые крепления
  3. Пап-пробы
  4. все вышеперечисленное одинаково хороши

Показать ответ

а. NAAT предпочтительнее для обнаружения T. vaginalis из-за его высокой чувствительности?

Заполните бланк

Трихомониаз вызывается _____.

Покажи ответ

Трихомониаз вызывается Trichomonas vaginalis.

Подумай об этом

  1. Назовите три организма (бактерия, гриб и простейшее), которые связаны с вагинитом.

Новостное бюро | ILLINOIS

CHAMPAIGN, штат Иллинойс — Большинство наборов для тестирования на вирусы основаны на трудоемких лабораторных методах подготовки и анализа; Например, тесты на новый коронавирус могут занять несколько дней, чтобы обнаружить вирус в мазках из носа.Теперь исследователи продемонстрировали недорогое, но чувствительное устройство на базе смартфона для тестирования вирусных и бактериальных патогенов, выполнение которого занимает около 30 минут. Аксессуар для смартфона стоимостью около 50 долларов может снизить нагрузку на испытательные лаборатории во время пандемии, такой как COVID-19.

Профессор биоинженерии и соруководитель исследования Рашид Башир.

Фото Л. Брайана Штауффера

Удалить

Отредактируйте встроенного носителя на вкладке «Файлы» и при необходимости вставьте заново.

Результаты нового межведомственного исследования, проведенного профессором электротехники и компьютерной инженерии Университета Иллинойса в Урбана-Шампейн Брайаном Каннингемом и профессором биоинженерии Рашидом Баширом, опубликованы в журнале Lab on a Chip.

«Проблемы, связанные с быстрым тестированием на патогены, приводят к большой неопределенности в отношении того, какие люди помещены в карантин, а также к целому ряду других медицинских и экономических проблем», — сказал Каннингем.

Исследование началось с цели выявления группы вирусных и бактериальных патогенов у лошадей, в том числе вызывающих тяжелые респираторные заболевания, подобные тем, которые представлены в COVID-19, заявили исследователи.

«Патогены лошадей, конечно, могут привести к разрушительным заболеваниям в популяциях животных, но одна из причин, по которой мы работаем с ними, связана с безопасностью. Патогены лошадей в нашем исследовании безвредны для человека », — сказал Каннингем.

Схематический чертеж новой системы устройства.

Изображение предоставлено Брайаном Каннингемом

Удалить

Отредактируйте встроенного носителя на вкладке «Файлы» и при необходимости вставьте заново.

Новое устройство для тестирования состоит из небольшого картриджа с реагентами для тестирования и порта для введения экстракта из носа или образца крови, сообщили исследователи.Все устройство прикрепляется к смартфону.

Внутри картриджа реагенты открывают внешнюю оболочку патогена, чтобы получить доступ к его РНК. Затем, по словам исследователей, молекула праймера усиливает генетический материал до многих миллионов копий примерно за 10-15 минут. Флуоресцентный краситель окрашивает копии и светится зеленым при освещении синим светодиодом, который затем обнаруживается камерой смартфона.

Фотография первой клипсы PathTracker.

Фото любезно предоставлено Брайаном Каннингемом

Удалить

Отредактируйте встроенного носителя на вкладке «Файлы» и при необходимости вставьте заново.

«Этот тест можно быстро провести на пассажирах перед посадкой в ​​самолет, на людях, идущих в тематический парк, или перед мероприятиями, такими как конференция или концерт», — сказал Каннингем. «Облачные вычисления через приложение для смартфонов могут позволить зарегистрировать отрицательный результат теста у организаторов мероприятия или как часть посадочного талона на рейс. Или человек, находящийся на карантине, может ежедневно сдавать анализы, регистрировать результаты у врача, а затем знать, когда безопасно выйти и воссоединиться с обществом.”

Есть несколько подготовительных шагов, которые в настоящее время выполняются вне устройства, и команда работает над картриджем, в котором есть все реагенты, необходимые для создания полностью интегрированной системы. Другие исследователи из Университета штата Айленд используют новый геном коронавируса для создания мобильного теста на COVID-19 и создают легко производимый картридж, который, по словам Каннингема, улучшит усилия по тестированию.

Соавторами исследования с Каннингемом и Баширом были Фу Сун, Ануруп Гангули и Мэтью Б.Уиллер из Университета штата Айленд; и Райан Брисбин и Дэвид Л. Хиршберг из RAIN Incubator; Критика Шанмугам из Вашингтонского университета; и ветеринар Дэвид М. Нэш.

Национальный научный фонд и Центр геномной диагностики Института геномной биологии им. Карла Р. Вёза США поддержали это исследование.

Башир также является деканом инженерного колледжа Грейнджер в Иллинойсе.

Каннингем также связан с биоинженерией, материаловедением и инженерией, Онкологическим центром, Институтом Карла Р.Институт геномной биологии Вёзе, Лаборатория микро- и нанотехнологий Холоньяка, Медицинский колледж Карла Иллинойса и Институт передовых наук и технологий Бекмана в Иллинойсе.

Каннингем является консультантом и владеет акциями Reliant Immune Diagnostics, компании, которая лицензировала технологию, описанную в этом пресс-релизе.

Трансмиссивные болезни

Векторы

Векторы — это живые организмы, которые могут передавать инфекционные патогены от человека к человеку или от животных к человеку.Многие из этих переносчиков являются кровососущими насекомыми, которые заглатывают болезнетворные микроорганизмы во время еды с кровью инфицированного хозяина (человека
или животное), а затем передают его новому хозяину после репликации патогена. Часто, когда переносчики становятся заразными, они способны передавать патоген на всю оставшуюся жизнь во время каждого последующего укуса / приема пищи кровью.

Трансмиссивные болезни

Трансмиссивные болезни — это болезни человека, вызываемые паразитами, вирусами и бактериями, которые передаются переносчиками.Ежегодно более 700000 человек умирают от таких болезней, как малярия, денге, шистосомоз, африканский трипаносомоз человека, лейшманиоз и др.
Болезнь Шагаса, желтая лихорадка, японский энцефалит и онхоцеркоз.

Бремя этих болезней является самым высоким в тропических и субтропических регионах, и они непропорционально поражают беднейшие слои населения. По утверждениям, с 2014 года крупные вспышки денге, малярии, чикунгуньи, желтой лихорадки и вируса Зика поразили население.
жизней и перегруженных систем здравоохранения во многих странах.Другие болезни, такие как чикунгунья, лейшманиоз и лимфатический филяриатоз, вызывают хронические страдания, пожизненную заболеваемость, инвалидность и периодическую стигматизацию.

Распространение трансмиссивных болезней определяется сложным комплексом демографических, экологических и социальных факторов. Глобальные путешествия и торговля, незапланированная урбанизация и en

Список трансмиссивных болезней в соответствии с их переносчиками

Следующая таблица представляет собой неполный список трансмиссивных болезней, отсортированный в соответствии с переносчиками, которыми они передаются.В списке также указан тип патогена, вызывающего заболевание у человека.

9117 9117 9117 911 911 911 911 911 911 911 911 911 Вирус

Паразит

Вирус

Leaf
лихорадка (флеботомусная лихорадка)

Вектор

Болезнь
вызвано

Тип
возбудителя

Комаров

Aedes

Чикунгунья

Денге

Лимфатический филяриат

Лихорадка Рифт-Валли

Желтая лихорадка

Зика

Вирус

54 Вирус

Вирус

Паразит

Anopheles

Лимфатический филяриатоз

Малярия

Паразит

Паразит

Culex

Culex

9liasver

Водные улитки

Шистосомоз (бильгарциоз)

Паразиты

Блэкфлайз

Онхоцеркоз
(речная слепота)

Паразит

Блохи

Чума (передается от крыс человеку)

Тунгиоз

Бактерии

Эктопаразиты

Вши

Сыпной тиф

Возвратный тиф

Бактерии

Бактерии

Мухи

4

Паразит

Вирус

Клещи

Крымско-Конго геморрагическая лихорадка

Болезнь Лайма

Возвратный тиф (боррелиоз)

Риккетсиоз
заболевания (например: пятнистая лихорадка и ку-лихорадка)

Клещевой энцефалит

Туляремия

Вирус

Бактерии

Бактерии

Бактерии

Вирус

Бактерии

Триатомные клопы

Болезнь Чагаса (американский трипаносомоз)

9114

9117 927 9284000 Парасет мухи

Сонная болезнь (африканский трипаносомоз)

Паразиты

Ответ ВОЗ

Всемирный комитет по борьбе с переносчиками болезней (GVCR) 2017–2030 утвердил « Global Vector Control Response (GVCR) 2017–2030» Ассамблея здравоохранения в 2017 г.Он представляет собой стратегическое руководство для стран и партнеров по развитию по безотлагательному усилению борьбы с переносчиками болезней в качестве фундаментального подхода к профилактике болезней и реагированию на вспышки. Для достижения этой цели требуется переориентация программ борьбы с переносчиками болезней, поддерживаемая повышенным техническим потенциалом, улучшенной инфраструктурой, усиленными системами мониторинга и эпиднадзора, а также большей мобилизацией населения. В конечном итоге это поддержит внедрение комплексного подхода к борьбе с переносчиками болезней, который позволит достичь национальных и глобальных целей по конкретным заболеваниям и будет способствовать достижению Целей в области устойчивого развития и всеобщего охвата услугами здравоохранения.

Секретариат ВОЗ предоставляет странам и партнерам по развитию стратегические, нормативные и технические рекомендации по усилению борьбы с переносчиками болезней в качестве фундаментального подхода, основанного на GVCR, для предотвращения болезней и реагирования на вспышки. В частности, ВОЗ реагирует на трансмиссивные болезни посредством:

  • предоставления основанных на фактических данных рекомендаций по борьбе с переносчиками и защите людей от инфекций;
  • предоставление технической поддержки странам, чтобы они могли эффективно управлять случаями и вспышками;
  • поддержка стран в улучшении их систем отчетности и отражении истинного бремени болезни;
  • обеспечивает обучение (наращивание потенциала) по клиническому ведению, диагностике и борьбе с переносчиками болезней при поддержке некоторых из сотрудничающих центров; и
  • поддержка разработки и оценки новых инструментов, технологий и подходов для борьбы с трансмиссивными болезнями, включая технологии борьбы с переносчиками болезней и борьбы с ними.

Решающим элементом в снижении бремени трансмиссивных болезней является изменение поведения. ВОЗ работает с партнерами в целях просвещения и повышения осведомленности общественности, чтобы люди знали, как защитить себя и свои сообщества от комаров, клещей, насекомых, мух и других переносчиков.

Доступ к воде и санитарии является очень важным фактором в борьбе с болезнями и их искоренении. ВОЗ работает вместе со многими различными государственными секторами над улучшением хранения воды и санитарии, тем самым помогая контролировать эти заболевания на уровне сообществ.

Топ-6 триггеров женских ИМП

На инфекции мочевыводящих путей приходится примерно 8,1 миллиона посещений больниц в год. Поскольку это вторая по частоте инфекция в организме (после простуды), скорее всего, вы или ваш друг перенесли по крайней мере одну. На самом деле — извините, дамы — пожизненный риск заражения инфекцией мочевыводящих путей (ИМП) составляет более 50 процентов. Что еще хуже, если у вас была ИМП, вы можете заразиться другой.

Разве не было бы здорово остановить инфекцию мочевыводящих путей (ИМП) до того, как она начнется?

Понимание триггеров ИМП может помочь предотвратить ненужные страдания, бесконечные посещения туалета и повторный визит к врачу.

Шесть главных триггеров:

1.

Аллергия

Если вы предрасположены к ИМП и испытываете воспаление, зуд и общий дискомфорт, у вас может быть аллергия на ванну или женские товары. Аллергическая реакция может вызвать отек, покраснение, а в некоторых случаях — выделения. Аллергия на продукт может вызвать рост микроорганизмов, что приведет к ИМП.

  • Совет: избегайте порошков, дезодорантов и парфюмированного мыла и выбирайте продукты для ванной без запаха, включая мыло, туалетную бумагу, тампоны и женские салфетки.Носите нижнее белье из хлопка и используйте синтетические ткани, например полиэстер и вискозу.
2.

Контроль над рождаемостью

Некоторые противозачаточные средства могут вызывать ИМП, а другие — нет. Варианты, которые могут сделать женщин более предрасположенными к ИМП, включают диафрагмы, презервативы и спермицидные пенки.

  • Совет: если вы испытали ИМП и считаете, что это может быть связано с вашим противозачаточным средством, посетите врача и изучите альтернативные методы контрацепции.
3.

Обезвоживание

От обезвоживания страдает все ваше тело.Недостаток воды создает чрезмерную нагрузку на сердце, иммунную систему и почки. Если ваша иммунная система не может функционировать должным образом, бактерии, которые в противном случае были бы выведены из организма, могут размножаться в ваших мочевыводящих путях.

  • Совет: избегайте обезвоживания! Вместо того, чтобы сосредотачиваться на том, чтобы выпивать определенное количество в день, сосредоточьтесь на цвете своей мочи. Прозрачная или светлая моча означает гидратацию, а яркая или темно-желтая моча означает обезвоживание.
4.

Пищевые добавки

Пищевые добавки были тщательно покрыты в связи с угрозами, которые они представляют для физического здоровья, но они также могут быть катализатором неприятных ИМП.Химические вещества и консерванты надежно помогают бактериям и организмам расти внутри мочевого пузыря.

  • Совет: держитесь подальше от продуктов с высоким содержанием фруктозы, кофеина, сахара, фосфорной кислоты и ограничьте потребление алкоголя. Если вы чувствительны к определенным продуктам и должны побаловать себя, возьмите противодействие кислым напитком, включая лимон или клюкву, или возьмите горсть черники, богатой антиоксидантами.
5.

Инфекции кишечной палочки и дрожжей

Эти типы инфекций являются наиболее частой причиной ИМП.Дрожжи и кишечная палочка могут перемещаться из прямой кишки или влагалища во время посещения туалета, а затем подниматься по уретре в мочевой пузырь, вызывая инфекцию.

  • Совет: не протирайте заднюю часть вперед, так как это может легко вызвать ИМП. Вместо этого не забывайте протирать спереди назад. Используйте ту же технику очищения во время купания.
6.

Сексуальная активность

Если вы часто испытываете ИМП в течение 24 часов после секса, скорее всего, причиной является ваша сексуальная активность. Сильное трение и определенные положения (например, женщина сверху) могут способствовать развитию ИМП.В редких случаях у женщины может быть аллергия на сперму партнера.

  • Совет: очищайте личное пространство до и после полового акта. Мочеиспускание сразу после секса также очищает уретру и убивает бактерии. Если вы считаете, что причиной может быть трение, попробуйте другую сексуальную позу.

Пробиотики и бактериальный вагиноз | Лаборатория по изучению пробиотиков

Бактериальный вагиноз (БВ) — наиболее частая инфекция у женщин детородного возраста, поражающая примерно 1 из 3 женщин.Тем не менее, что удивительно, многие женщины даже не слышали об этом. Мы решили попытаться повысить осведомленность. В этой статье мы рассмотрим, как пробиотики могут помочь тем, кто страдает этим заболеванием, и обсудим, какие пробиотики лучше всего принимать при БВ.

Итак, что же такое бактериальный вагиноз?

Бактериальный вагиноз характеризуется чрезмерным ростом патогенных организмов (определение в глоссарии: патогенные) во влагалище. Gardnerella vaginalis — наиболее часто встречающийся патоген, но также могут присутствовать бактерии других видов, такие как Prevotella, Mycoplasma hominis, и Mobiluncus.Этот патогенный разрастание приводит к относительному недостатку здоровых видов бактерий во влагалище. В результате возникает состояние дисбактериоза (дисбаланса). По сути, БВ — это просто дисбактериоз влагалища и мочеполовых путей. Так же, как флора кишечника может потерять свой здоровый баланс, может потерять и флора интимной зоны.

Обычно большинство бактерий, обнаруживаемых во влагалище, принадлежат к роду Lactobacillus. Лактобациллы помогают поддерживать здоровье влагалища разными способами, одним из которых является выработка молочной кислоты.Молочная кислота снижает рН влагалища и поддерживает его в пределах здорового (кислого) уровня ниже 4,5. Поддержание кислого pH во влагалище очень важно для интимного здоровья. Когда область становится слишком щелочной, могут начать процветать болезнетворные бактерии. Это становится порочным кругом, поскольку чрезмерный рост патогенов повышает pH, и, в свою очередь, повышенный pH стимулирует колонизацию еще большего количества патогенов.

Женщины часто не подозревают о том, что у них БВ, так как в 50% случаев он не вызывает симптомов.Однако, если его не лечить, это может привести к другим осложнениям, таким как снижение фертильности , повышенный риск выкидыша и снижение веса при рождении (когда беременность действительно наступает). Если симптомы присутствуют, они обычно включают жидкие белые выделения и неприятный запах.

Что вызывает состояние?

Врачи не всегда уверены, что вызывает заболевание, но определенные факторы образа жизни, такие как частое спринцевание или использование мыла или гелей для душа в интимной зоне, могут слишком сильно подщелачивать влагалище, что приводит к размножению нежелательных штаммов бактерий и возникновению инфекции. .

Незащищенный секс также может увеличить вероятность заражения BV, поскольку каждый половой партнер может занести новые и потенциально патогенные бактерии во влагалище, нарушая хрупкий баланс флоры. Даже оральный секс может нарушить микробиом влагалища: в недавнем исследовании 2020 года 5 исследователей обнаружили связь между определенным типом патогенных бактерий, обычно обнаруживаемых во рту, и БВ. Похоже, что Fusobacterium nucleatum, патоген, вызывающий заболевание десен и образование зубного налета, способствует и способствует росту Gardnerella vaginalis, который часто обнаруживается во влагалище пациентов с BV.Исследование предполагает, что наиболее вероятным объяснением того, что этот патоген может быть обнаружен во влагалищном тракте, является оральный секс.

Однако важно отметить, что БВ не считается инфекцией, передающейся половым путем, это просто дисбаланс в микробиоме влагалища.

Мытье с мылом может изменить pH влагалища и стимулировать рост патогенных бактерий.

Однако для подавляющего большинства пациентов не существует очевидной внешней причины дисбактериоза. В этих случаях необходимо учитывать связь между флорой кишечника и флорой влагалища.

Из-за анатомической близости влагалища к анальному отверстию бактерии из желудочно-кишечного тракта могут легко перемещаться (мигрировать) из одной области в другую. Таким образом, любые патогенные штаммы бактерий, присутствующие в кишечнике, могут инфицировать влагалищный тракт и вызвать дисбаланс тонкого баланса флоры в нем.

Чтобы узнать больше о том, как поддерживать баланс вагинального микробиома, прочтите Все о микрофлоре влагалища

Могут ли пробиотики помочь больным БВ и предотвратить его рецидивы?

Учитывая, что BV представляет собой дисбаланс между хорошими и плохими бактериями во влагалище, было бы логично, что повышение уровня «дружественных» бактерий с помощью пробиотических добавок может быть полезным.

Однако вернуть полезные штаммы бактерий во влагалище не так просто, как использовать любой пробиотический штамм. Штаммы должны выжить при прохождении через пищеварительный тракт по всей длине. Они также должны иметь возможность успешно мигрировать во влагалище, а затем колонизировать его. Штаммы пробиотических бактерий, которые хорошо колонизируются в пищеварительном тракте, не обязательно демонстрируют хорошее прилипание к слизистой оболочке стенки влагалища.

В настоящее время проводятся обширные исследования эффективности пробиотиков при лечении БВ.Понятно, что род Lactobacillus является преобладающим родом бактерий, обнаруживаемых в здоровом влагалище. Итак, большинство исследований здоровья влагалища сосредоточено на видах Lactobacillus.

Lactobacillus rhamnosus GR-1 ® и Lactobacillus reuteri RC-14 ®

В рандомизированном двойном слепом плацебо-контролируемом исследовании 1 125 женщин были разделены на две группы. Одна группа получала 7-дневный курс антибиотиков, а вторая группа получала оба антибиотика в сочетании с пробиотическим составом, содержащим пробиотические штаммы L.rhamnosus GR-1 ® и L. reuteri RC-14 ® .

Прием пробиотиков продолжали еще в течение 3 недель после окончания антибактериальной терапии. Показатели успеха увеличились с 40% (при использовании только антибактериальной терапии) до 88% (при комбинированной терапии)!

Эти два штамма дружественных бактерий изначально были выделены из здорового вагинального тракта. Это свидетельствует о том, что они являются неотъемлемой частью микробиоты влагалища.

Мало того, что L. rhamnosus GR-1 ® и L. reuteri RC-14 ® достигают интимной области и прилипают к слизистой оболочке влагалища, они также эффективно колонизируют эту область. Их присутствие в вагинальных мазках, взятых в течение 3 недель после прекращения приема пробиотиков, является демонстрацией этого. Медицинские работники могут узнать больше об исследовании с использованием L. rhamnosus GR-1 ® и L. reuteri RC-14 ® в базе данных пробиотиков.

График 1 показывает эффективность этой комбинации пробиотиков в поддержке женщин с БВ.

Обновление

, май 2017 г .: Еще одно большое новое клиническое испытание показывает дальнейшие перспективы использования пробиотических штаммов у больных БВ.

Lactobacillus brevis CD2 ® , Lactobacillus salivarius FV2 ® и Lactobacillus plantarum FV9 ®

В довольно небольшом, но хорошо спланированном двойном слепом рандомизированном контролируемом исследовании 2 34 женщины с БВ получали либо вагинальную таблетку пробиотика, либо плацебо в течение 7 дней.Пробиотик содержал не менее 10 миллиардов жизнеспособных лактобацилл; в частности L. brevis CD2 ® , L. salivarius FV2 ® и L. plantarum FV9 ® . Частота купирования симптомов за 2 недели составила 61% (11 из 18) в группе активного лечения. По сравнению с 19% (три из 16) в группе плацебо (p = 0,017) — это поразительные результаты!

Практикующие врачи могут узнать больше об этом клиническом испытании на сайте Probiotic Professionals.

Исследования показали, что пробиотики могут быть эффективны для облегчения симптомов, связанных с БВ, таких как зуд и неприятный запах.

Lactobacillus acidophilus LA-14 ® и Lactobacillus rhamnosus HN001 ®

В двойном слепом плацебо-контролируемом рандомизированном исследовании 3 были изучены пробиотические штаммы L. acidophilus La-14 ® и L. rhamnosus HN001 ® , а также бычий лактоферрин.Было показано, что при добавлении к лечению антибиотиками эта комбинация значительно улучшает симптомы BV. Кроме того, это также снизило частоту рецидивов по сравнению с лечением только антибиотиками.

48 взрослых женщин с симптомами БВ получали либо антибиотики, либо смесь пробиотиков для перорального приема, а также лактоферрин в течение семи дней; или антибиотики плюс плацебо. После этого группы были проинструктированы принимать по одной капсуле в день в течение десяти дней каждый месяц (начиная с первого дня менструации) либо пробиотиков плюс лактоферрин, либо плацебо в течение шести месяцев.

Симптомы, такие как выделения из влагалища и зуд, были заметно уменьшены при применении комбинированной пробиотической терапии по сравнению с плацебо. Что наиболее важно, частота рецидивов также была намного ниже. Медицинские работники могут посетить базу данных пробиотиков, чтобы узнать больше об исследованиях с участием L. rhamnosus HN001 ®

Lactobacillus crispatus CTV-05

Lactobacillus crispatus CTV-05 недавно был оценен в двойном слепом рандомизированном плацебо-контролируемом исследовании на предмет его эффектов у 228 женщин в пременопаузе с рецидивирующим бактериальным вагинозом.В группе вмешательства женщинам вводили 2 миллиарда КОЕ L. crispatus CTV-05 с помощью вагинального аппликатора ежедневно в течение 24 недель по сравнению с плацебо. К 12 неделе у 30% группы вмешательства был рецидив бактериального вагиноза по сравнению с 45% группы плацебо (p = 0,01). Эти положительные результаты сохранялись до 24 недели 4 .

Как следует принимать пробиотики при БВ?

Вы можете задаться вопросом, лучше ли пробиотики для влагалища принимать перорально или их следует вводить интравагинально.

Использование правильных штаммов пробиотиков — безусловно, самое важное соображение. Однако для многих способ доставки, безусловно, является второстепенным.

Предпочтение будет зависеть от человека и того, предпочтет ли он проглотить капсулу или ввести вагинальный суппозиторий. Тестирование показало, что до тех пор, пока правильных штаммов бактерий принимаются орально (то есть те, которые изначально были обнаружены во влагалищном тракте), бактерии легко могут выжить при прохождении через кишечник.Затем они могут совершить путешествие из прямой кишки во влагалище. Это было доказано клиническими испытаниями, согласно которым определенные пробиотики были обнаружены во влагалищных мазках вскоре после их приема внутрь.

Хотя введение пробиотиков непосредственно во влагалище может гарантировать, что они быстрее достигнут места назначения, большинство женщин предпочитают легкость и удобство пероральных капсул. Однако оба метода использования показывают одинаковую эффективность в долгосрочной перспективе.

Рекомендации по долгосрочной профилактике БВ

Я часто вижу в своей клинике женщин, которые были у своего терапевта и прописали курс антибиотиков.Это может принести временное облегчение; однако со временем антибиотики действительно усугубляют дисбактериоз.

Соблюдение диеты с низким содержанием сахара может быть полезным для снижения вероятности выделения глюкозы с мочой (что может способствовать чрезмерному росту патогенных видов бактерий в мочеполовых путях). Однако добавление пробиотиков наряду с этими диетическими изменениями всегда является краеугольным камнем любого естественного протокола восстановления здоровья вагинальной флоры.

Если вы хотите узнать больше о пробиотиках для женского здоровья, ознакомьтесь с нашими часто задаваемыми вопросами: Какие пробиотики лучше всего подходят для женщин?

Практикующим врачам может быть интересно узнать больше о роде Lactobacillus и его штаммах в базе данных пробиотиков.

Список литературы

  1. Anukam, et al. (2006). Увеличение противомикробной терапии бактериального вагиноза пероральными пробиотиками Lactobacillus rhamnosus GR-1 и Lactobacillus reuteri RC-14. Microbes Infect, 8 (6): pp. 1450-4
  2. .

  3. Mastromarino et al. (2009). Эффективность вагинальных таблеток, содержащих Lactobacillus, при лечении симптоматического бактериального вагиноза. Clin Microbiol Infect, 15 (1): стр. 67-74
  4. Russo R et al. (2018). Доказательная смесь, содержащая штаммы Lactobacillus и лактоферрин для предотвращения рецидива бактериального вагиноза: двойное слепое плацебо-контролируемое рандомизированное клиническое исследование.Полезные микробы, опубликовано в Интернете перед печатью 10 декабря 2018 г.
  5. Cohen, C. et al. (2020) «Рандомизированное испытание лактина-V для предотвращения рецидива бактериального вагиноза», Медицинский журнал Новой Англии, стр. 382 (20), 1906-1915 гг.
  6. Agarwal K. 2020. Перекрестное вскармливание гликанов поддерживает мутуализм между Fusobacterium и микробиотой влагалища. PLOS Биология. https://journals.plos.org/plosbiology/article?id=10.1371/journal.pbio.3000788

Эта статья последний раз обновлялась 18 сентября 2020 г.

Неспецифические и дифференцированные по полу эффекты вакцин

  • 1.

    Higgins, J. P. et al. Связь вакцины, содержащей БЦЖ, АКДС и кори, с детской смертностью: систематический обзор. BMJ 355 , i5170 (2016).

    PubMed
    PubMed Central

    Google Scholar

  • 2.

    Шенн, Ф. Неспецифические эффекты вакцин и снижение детской смертности. Clin.Ther. 35 , 109–114 (2013).

    PubMed

    Google Scholar

  • 3.

    Aaby, P., Kollmann, T. R. & Benn, C. S. Неспецифические эффекты вакцинации новорожденных и младенцев: общественное здравоохранение, иммунологические и концептуальные проблемы. Нац. Иммунол. 15 , 895–899 (2014).

    CAS
    PubMed

    Google Scholar

  • 4.

    Benn, C. S., Фискер, А. Б., Рикманн, А., Сёруп, С. и Аби, П. Вакцинология: время менять парадигму? Lancet Infect. Dis . (В прессе).

  • 5.

    Aaby, P., Ravn, H. & Benn, C. S. Обзор ВОЗ возможных неспецифических эффектов вакцины против дифтерии, столбняка и коклюша. Pediatr. Заразить. Дис. J. 35 , 1247–1257 (2016).

    PubMed

    Google Scholar

  • 6.

    Кляйн, С. Л., Шенн, Ф., Мосс, В. Дж., Бенн, С. С. и Аби, П. RTS, S вакцина против малярии и повышение смертности девочек. mBio 7 , e00514-16 (2016).

    PubMed
    PubMed Central

    Google Scholar

  • 7.

    Aaby, P. et al. Проверка гипотезы о том, что вакцина против дифтерии, столбняка и коклюша оказывает отрицательное неспецифическое и дифференцированное по полу влияние на выживаемость детей в странах с высокой смертностью. BMJ Open 2 , e000707 (2012).

    PubMed
    PubMed Central

    Google Scholar

  • 8.

    Шенн, Ф. График последней вакцины: спасение лишнего миллиона жизней в год? Clin. Заразить. Дис. https://doi.org/10.1093/cid/ciaa292 (2020).

    Артикул
    PubMed

    Google Scholar

  • 9.

    Sørup, S. et al. Живая вакцина против кори, эпидемического паротита и краснухи и риск госпитализации по поводу ненаправленных инфекций. JAMA 311 , 826–835 (2014).

    PubMed

    Google Scholar

  • 10.

    Барденхейер, Б. Х., МакНил, М. М., Води, А. П., МакНиколл, Дж. М. и ДеСтефано, Ф. Риск госпитализаций нецелевых инфекционных заболеваний среди детей в США после инактивированных и живых вакцин, 2005–2014 гг. Clin. Заразить. Дис. 65 , 729–737 (2017).

    PubMed
    PubMed Central

    Google Scholar

  • 11.

    Freyne, B. & Curtis, N. Предотвращает ли вакцинация новорожденных БЦЖ аллергические заболевания в более позднем возрасте? Arch. Дис. Ребенок. 99 , 182–184 (2014).

    PubMed

    Google Scholar

  • 12.

    Benitez, M. L. R. et al. Mycobacterium bovis БЦЖ в терапии метастатической меланомы. Заявл. Microbiol. Biotechnol. 103 , 7903–7916 (2019).

    CAS
    PubMed

    Google Scholar

  • 13.

    Guallar-Garrido, S. & Julian, E. Bacillus Calmette-Guérin (BCG) терапия рака мочевого пузыря: обновленная информация. Immunotargets Ther. 9 , 1–11 (2020).

    CAS
    PubMed
    PubMed Central

    Google Scholar

  • 14.

    Netea, M. G. et al. Определение тренированного иммунитета и его роли в здоровье и болезнях. Нац. Rev. Immunol. https://doi.org/10.1038/s41577-020-0285-6 (2020).

    Артикул
    PubMed
    PubMed Central

    Google Scholar

  • 15.

    Кюхтрайбер, В. М. и Фаустман, Д. Л. БЦЖ-терапия диабета 1 типа: восстановление сбалансированного иммунитета и обмена веществ. Trends Endocrinol. Метаб. 30 , 80–92 (2019).

    PubMed

    Google Scholar

  • 16.

    Yamazaki-Nakashimada, M.A. et al. БЦЖ: многоликая вакцина. Hum. Вакцин. Immunother. https://doi.org/10.1080/21645515.2019.1706930 (2020).

    Артикул
    PubMed

    Google Scholar

  • 17.

    Гофрит, О. Н. и др. Бацилла Кальметта-Герена (БЦЖ) снижает заболеваемость болезнью Альцгеймера у пациентов с раком мочевого пузыря. PLoS One 14 , e0224433 (2019).

    CAS
    PubMed
    PubMed Central

    Google Scholar

  • 18.

    де Кастро, М. Дж., Пардо-Секо, Дж. И Мартинон-Торрес, Ф. Неспецифическая (гетерологичная) защита новорожденных вакцинацией БЦЖ от госпитализации из-за респираторной инфекции и сепсиса. Clin. Заразить. Дис. 60 , 1611–1619 (2015).

    PubMed

    Google Scholar

  • 19.

    Biering-Sorensen, S. et al. Ранняя вакцинация BCG-Дания и неонатальная смертность среди младенцев с массой тела <2500 г: рандомизированное контролируемое исследование. Clin. Заразить. Дис. 65 , 1183–1190 (2017).

    PubMed
    PubMed Central

    Google Scholar

  • 20.

    Stensballe, L.G. et al. Вакцинация БЦЖ при рождении и госпитализация в раннем детстве: рандомизированное клиническое многоцентровое исследование. Arch. Дис. Ребенок. 102 , 224–231 (2017).

    PubMed

    Google Scholar

  • 21.

    Arts, R. J. W. et al. Вакцинация БЦЖ защищает людей от экспериментальной вирусной инфекции за счет индукции цитокинов, связанных с тренированным иммунитетом. Клеточный микроб-хозяин 23 , 89–100 e105 (2018).

    CAS
    PubMed

    Google Scholar

  • 22.

    Вардхана, Датау, Э. А., Султана, А., Манданг, В. В. и Джим, Э. Эффективность вакцинации против бациллы Кальметта-Герена для профилактики острой инфекции верхних дыхательных путей у пожилых людей. Acta Med. Индонезийский. 43 , 185–190 (2011).

    CAS
    PubMed

    Google Scholar

  • 23.

    Аби П.И Бенн, С. С. Разработка концепции полезного неспецифического эффекта живых вакцин с помощью эпидемиологических исследований. Clin. Microbiol. Заразить. 25 , 1459–1467 (2019).

    CAS
    PubMed

    Google Scholar

  • 24.

    Rieckmann, A. et al. Вакцинация против оспы и туберкулеза увеличивает долгосрочную выживаемость: датское когортное исследование 1971–2010 гг. Внутр. J. Epidemiol. 46 , 695–705 (2017).

    PubMed

    Google Scholar

  • 25.

    Кляйн, С. Л., Едлика, А. и Пекош, А. X и Y иммунных ответов на вирусные вакцины. Lancet Infect. Дис. 10 , 338–349 (2010).

    PubMed
    PubMed Central

    Google Scholar

  • 26.

    Aaby, P. et al. Долгосрочная выживаемость после вакцинации против кори Эдмонстон-Загреб в Гвинее-Бисау: повышенный уровень женской смертности. J. Pediatr. 122 , 904–908 (1993).

    CAS
    PubMed

    Google Scholar

  • 27.

    Aaby, P. et al. Различия в женской и мужской смертности после вакцинации против кори с высоким титром и связь с последующей вакцинацией против дифтерии, столбняка и коклюша и инактивированного полиовируса: повторный анализ исследований в Западной Африке. Ланцет 361 , 2183–2188 (2003).

    PubMed

    Google Scholar

  • 28.

    Aaby, P. et al. Повышенное соотношение женской и мужской смертности, связанное с инактивированными вакцинами против полиомиелита и дифтерии, столбняка и коклюша: наблюдения по результатам испытаний вакцинации в Гвинее-Бисау. Pediatr. Заразить. Дис. J. 26 , 247–252 (2007).

    PubMed

    Google Scholar

  • 29.

    Flanagan, K. L. et al. Половые различия в вакцино-специфических и нецелевых эффектах вакцин. Вакцина 29 , 2349–2354 (2011).

    CAS
    PubMed

    Google Scholar

  • 30.

    Кляйн, С. Л. и Фланаган, К. Л. Половые различия в иммунных ответах. Нац. Rev. Immunol. 16 , 626–638 (2016).

    CAS
    PubMed

    Google Scholar

  • 31.

    Фланаган, К. Л., Финк, А. Л., Плебански, М. и Кляйн, С. Л. Половые и гендерные различия в результатах вакцинации на протяжении всей жизни. Annu. Rev. Cell Dev. Биол. 33 , 577–599 (2017).

    CAS
    PubMed

    Google Scholar

  • 32.

    Aaby, P. et al. Неспецифические эффекты стандартной противокоревой вакцины в возрасте 4,5 и 9 месяцев на детскую смертность: рандомизированное контролируемое исследование. BMJ 341 , c6495 (2010).

    PubMed
    PubMed Central

    Google Scholar

  • 33.

    Бенн С., Нетеа М. Г., Селин Л. К. и Аби П. Небольшой укол — большой эффект: неспецифическая иммуномодуляция вакцинами. Trends Immunol. 34 , 431–439 (2013).

    CAS
    PubMed

    Google Scholar

  • 34.

    Brook, B. et al. Экстренный гранулопоэз, вызванный вакцинацией БЦЖ, обеспечивает быструю защиту от сепсиса новорожденных. Sci. Перевод Med . https://stm.sciencemag.org/lookup/doi/10.1126/scitranslmed.aax4517 (2020).

  • 35.

    Aaby, P. et al. Вакцинация против кори при наличии или отсутствии материнских антител к кори: влияние на выживаемость детей. Clin. Заразить. Дис. 59 , 484–492 (2014).

    CAS
    PubMed
    PubMed Central

    Google Scholar

  • 36.

    Benn, C. S., Fisker, A. B., Whittle, H. C. и Aaby, P. Ревакцинация живыми аттенуированными вакцинами оказывает дополнительные положительные неспецифические эффекты на общую выживаемость: обзор. EBioMed. 10 , 312–317 (2016).

    Google Scholar

  • 37.

    Коллманн, Т. Р., Марчант, А. и Уэй, С. С. Стратегии вакцинации для повышения иммунитета новорожденных. Наука 368 , 612–615 (2020).

    CAS
    PubMed

    Google Scholar

  • 38.

    Noho-Konteh, F. et al. Дифференциальные по признаку пола неспецифические иммунологические эффекты вакцинации против дифтерии, столбняка, коклюша и кори. Clin. Заразить. Дис. 63 , 1213–1226 (2016).

    CAS
    PubMed

    Google Scholar

  • 39.

    Zivkovic, I. et al. Половой диэргизм в ответе антител на цельновирусную трехвалентную инактивированную вакцину против гриппа у беспородных мышей. Вакцина 33 , 5546–5552 (2015).

    CAS
    PubMed

    Google Scholar

  • 40.

    Живкович, И.и другие. Смещение по полу в гуморальном иммунном ответе мышей на вакцину против гриппа зависит от типа вакцины. Биологические препараты 52 , 18–24 (2018).

    CAS
    PubMed

    Google Scholar

  • 41.

    Финк, А. Л., Энгл, К., Урсин, Р. Л., Танг, В. Ю. и Кляйн, С. Л. Биологический пол влияет на эффективность вакцины и защиту от гриппа у мышей. Proc. Natl Acad. Sci. США 115 , 12477–12482 (2018).

    CAS
    PubMed

    Google Scholar

  • 42.

    Potluri, T. et al. Возрастные изменения влияния половых стероидов на реакцию на вакцину против гриппа у мужчин и женщин. Вакцины NPJ 4 , 29 (2019).

    PubMed
    PubMed Central

    Google Scholar

  • 43.

    Andersen, A. et al. Национальные кампании иммунизации пероральной вакциной против полиомиелита снижают общую смертность: естественный эксперимент в рамках семи рандомизированных испытаний. Фронт. Общественное здравоохранение 6 , 13 (2018).

    PubMed
    PubMed Central

    Google Scholar

  • 44.

    Uthayakumar, D. et al. Неспецифические эффекты вакцин, проиллюстрированные на примере БЦЖ: от наблюдений к демонстрациям. Фронт. Иммунол. 9 , 2869 (2018).

    CAS
    PubMed
    PubMed Central

    Google Scholar

  • 45.

    Miller, A. et al. Корреляция между универсальной политикой вакцинации БЦЖ и снижением заболеваемости и смертности от COVID-19: эпидемиологическое исследование. Препринт: medRxiv https://doi.org/10.1101/2020.03.24.20042937 (2020).

  • 46.

    Shet, A. et al. Дифференциальная смертность, связанная с COVID-19, и использование вакцины БЦЖ в странах. Препринт: medRxiv https://doi.org/10.1101/2020.04.01.20049478 (2020).

  • 47.

    Сала, Г. и Миякава, Т.Связь политики вакцинации БЦЖ с распространенностью и смертностью от COVID-19. Препринт: medRxiv https://doi.org/10.1101/2020.03.30.20048165 (2020).

  • 48.

    Floc’h, F. & Werner, G.H. Повышенная устойчивость к вирусным инфекциям мышей, инокулированных БЦЖ (бацилла Calmette-Guérin). Ann. Иммунол. 127 , 173–186 (1976).

    Google Scholar

  • 49.

    Кертис Н., Воробей А., Гебрейесус, Т. А. и Нетета, М. Г. Рассмотрение вопроса о вакцинации БЦЖ для снижения воздействия COVID-19. Ланцет https://doi.org/10.1016/S0140-6736(20)31025-4 (2020).

    Артикул
    PubMed
    PubMed Central

    Google Scholar

  • 50.

    Уэнам, К., Смит, Дж. И Морган, Р. COVID-19: гендерные последствия вспышки. Ланцет 395 , 846–848 (2020).

    CAS
    PubMed
    PubMed Central

    Google Scholar

  • 51.

    Zeng, F. et al. Сравнительное исследование антител IgG к SARS-CoV-2 у пациентов с COVID-19 мужского и женского пола: возможная причина, лежащая в основе различных результатов в зависимости от пола.

  • Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.